EGFR在卵巢上皮性腫瘤中的表達及RNAi靶向作用的研究.pdf

1、分類號： 密級： U D C ： 學號：406520412361南 昌 大 學 醫(yī) 學 院 碩 士 研 究 生學 位 論 文EGFR 在卵巢上皮性腫瘤中的表達及 在卵巢上皮性腫瘤中的表達及 RNAi 靶向作用的研究 靶向作用的研究EGFR expression in ovarian epithelial tumors and RNAitargeted action research孫俊青培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學醫(yī)學院指導教師姓名、職

2、稱：于曉紅 主任醫(yī)師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：病理學與病理生理學論文答辯日期： 2015 年答辯委員會主席：評閱人：2015 年 5 月 30 日摘要II摘 要 摘 要目的： 目的：1.研究表皮生長因子受體（Epidermal growth factor receptor，EGFR)在卵巢上皮性腫瘤中的表達。2.探討 RNA 干擾 EGFR 基因的表達情況及對腫瘤細胞增殖情況的影響。方法： 方法：1.選擇卵巢良性腫瘤 20

3、例（良性組），卵巢交界性腫瘤 40 例（交界組），卵巢上皮性癌 40 例（惡性組）。使用免疫組化檢測 EGFR 蛋白的表達情況。統(tǒng)計學方法分析各組 EGFR 基因的表達。2.構建靶向 EGFR 基因干擾 siRNA 表達載體，轉染入 SKOV3 細胞中。實驗分為三組：對照組，空白質粒轉染組，特異性轉染組。RT-PCR 檢測 EGFR的基因表達情況。MTT 法分析細胞的增殖情況。平板集落實驗計算抑制率。結果： 結果：1.卵巢良性腫瘤，卵巢

4、交界性腫瘤，卵巢上皮性癌中 EGFR 陽性表達率分別為 20.0％，47.5％，85.0％，惡性組陽性表達率要高過另外兩組（P0.05）。EGFR 的陽性表達率與臨床 分 期 ， 病 理 分 級 及 腫 瘤 的 大 小 有 關 （ P0.05）。2.成功構建靶向 EGFR 基因干擾 siRNA 表達載體，轉染 SKOV3 細胞，RT-PCR 分析表明特異性轉染組和空白質粒組的細胞 EGFR mRNA 表達明顯受到抑制。將對數(shù)生長期的不同

5、組的細胞進行計數(shù)，繪制 MTT 細胞生長曲線，發(fā)現(xiàn)不同組細胞增殖情況存在差異，特異性轉染組的細胞生長明顯低于空白質粒組和對照組，細胞抑制率為 61.8%。平板集落實驗中，特異轉染組中細胞集落形成抑制率為 59.9％。結論： 結論：1.EGFR 蛋白在卵巢交界性腫瘤和卵巢上皮性癌都有表達，表達逐步升高。提示 EGFR 基因可能是卵巢上皮性腫瘤形成發(fā)展的重要影響因素。2.靶向 EGFR 的基因的 RNA 干擾能降低 SKOV3 細胞 EGF