AP-2α和Ets-1在前列腺癌細(xì)胞DU145和LNCaP中的表達(dá)水平及對(duì)PP2A-Aα的調(diào)控作用.pdf

1、蛋白磷酸酶2A(PP2A)是一種絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。它能控制細(xì)胞內(nèi)許多蛋白的磷酸化，從而調(diào)控細(xì)胞的生命活動(dòng)。如:蛋白質(zhì)合成，細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)，細(xì)胞周期，細(xì)胞凋亡，代謝和應(yīng)激反應(yīng)，由蛋白激酶引發(fā)的信號(hào)通路的調(diào)節(jié)。現(xiàn)在對(duì)PP2A的復(fù)雜性和它的功能的了解進(jìn)展迅速。最近的研究主要在于PP2A與人類(lèi)疾病相關(guān)變化，尤其是癌癥。PP2A是由3個(gè)亞基構(gòu)成:催化亞基，結(jié)構(gòu)亞基和調(diào)節(jié)亞基。亞基的交替與許多人類(lèi)惡性腫瘤有關(guān)，PP2A抑制劑或直接激活PP2A藥物

2、為癌癥治療帶來(lái)了曙光。目前關(guān)于PP2A-Aα基因是如何調(diào)控的研究已經(jīng)有了一些進(jìn)展，本實(shí)驗(yàn)分別構(gòu)建了過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子ETS-1與AP-2α的表達(dá)載體并分別轉(zhuǎn)入了LNCaP細(xì)胞，沉默了DU145細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子ETS-1與AP-2α。并利用Western blot技術(shù)與凝膠遷移滯后實(shí)驗(yàn)初步證明這些轉(zhuǎn)錄因子與PP2A-Aα表達(dá)水平的關(guān)系。通過(guò)實(shí)驗(yàn)我們得出了這些結(jié)論:
　　(1)轉(zhuǎn)錄因子Ets-1、AP-2α在DU145和LNCaP細(xì)胞系中

3、都有表達(dá);
　　(2)在DU145和LNCaP細(xì)胞系中，轉(zhuǎn)錄因子ETS-1不影響PP2A-Aα基因的表達(dá);
　　(3)凝膠遷移滯后實(shí)驗(yàn)證明，轉(zhuǎn)錄因子AP-2α在體外能與PP2A-Aα基因啟動(dòng)子序列特異性的結(jié)合;
　　(4)對(duì)于LNCaP細(xì)胞，過(guò)表達(dá)AP-2α能使PP2A-Aα的表達(dá)量減少，對(duì)于DU145細(xì)胞，沉默AP-2α能使PP2A-Aα的表達(dá)量增多，這證明AP-2α能夠負(fù)向調(diào)節(jié)PP2A-Aα基因的表達(dá);