白花蛇舌草中的2-羥基-3-甲基蒽醌誘導(dǎo)白血病細(xì)胞U937凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　白血病是當(dāng)今世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重的威脅了人類的健康和生命。目前我國(guó)白血病的發(fā)病率也正在持續(xù)上升。因此，白血病的治療已成為當(dāng)前備受關(guān)注的熱點(diǎn)話題之一。盡管白血病的病因及其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但中藥抗癌藥物的研究成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。2-羥基-3-甲基蒽醌(2-hydroxy-3-methylanthraquinone)是從天然白花蛇舌草中提取的一種單體，對(duì)多種腫瘤，如:白血病、胃癌、黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌

2、等有抑制其生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的作用，并在癌癥的預(yù)防和治療方面具有較強(qiáng)的活性。本研究旨在探討2-羥基-3-甲基蒽醌誘導(dǎo)白血病細(xì)胞U937凋亡的機(jī)制。為深入研究白花蛇舌草抗腫瘤機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1、采用Hoechst33258熒光染色觀察U937細(xì)胞形態(tài)變化;
　　2、采用Annexin Ⅴ FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀分析U937細(xì)胞的凋亡情況;
　　3、采用Western blot技術(shù)檢測(cè)磷酸化和

3、非磷酸化ERK1/2，JNK1/2和p38MAPK蛋白的表達(dá);
　　4、采用熒光分光光度計(jì)分析技術(shù)檢測(cè)caspase-3活性。
　　結(jié)果：
　　1、Hoechst33258染色結(jié)果顯示凋亡細(xì)胞的百分率隨著2-羥基-3-甲基蒽醌濃度的升高而增加。
　　2、Annexin Ⅴ FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)U937細(xì)胞凋亡:凋亡百分率隨著2-羥基-3-甲基蒽醌的濃度增加及作用時(shí)間的延長(zhǎng)而升高。
　　3、Wes

4、tern blot分析結(jié)果顯示隨著2-羥基-3-甲基蒽醌作用時(shí)間逐漸延長(zhǎng)，磷酸化p38MAPK蛋白的表達(dá)逐漸增強(qiáng)，磷酸化ERK1/2蛋白的表達(dá)水平逐漸下降，而磷酸化JNK1/2的表達(dá)不變。
　　4、熒光分光光度計(jì)分析結(jié)果顯示隨著2-羥基-3-甲基蒽醌的濃度增加及作用時(shí)間的延長(zhǎng)，caspase-3活性逐漸增強(qiáng)。
　　結(jié)論：
　　2-羥基-3-甲基蒽醌能夠誘導(dǎo)U937細(xì)胞凋亡，并具有時(shí)間和劑量依賴性，其作用機(jī)制與磷酸化p3