青心酮對(duì)LPS誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞TLR4表達(dá)及其相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)以脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)刺激造成血管內(nèi)皮細(xì)胞活化模型，觀察青心酮對(duì)活化內(nèi)皮細(xì)胞的Toll樣受體4(Tolllikereceptors4，TLR4)及其下游分子一一核因子一r,B(NF-r,B)、腫瘤壞死因子一α(TNF-a)表達(dá)的影響，探討青心酮治療子癇前期等病理性妊娠的藥理作用機(jī)制及TLR4信號(hào)系統(tǒng)在病理妊娠中的可能作用。 方法：本研究以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304為研究對(duì)象，用終

2、濃度為1μg／mLLPS誘導(dǎo)使其活化，以10一lmol／L，10-6mol／L和10-5mol／L青心酮對(duì)激活的細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，分別用半定量逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測TLR4mRNA的表達(dá)，用免疫印跡法檢測TLR4、Ir．Bα的蛋白質(zhì)的表達(dá)，并用ELISA法檢測上清液TNF-α的含量。實(shí)驗(yàn)分三部分進(jìn)行：1、研究青心酮對(duì)激活的血管內(nèi)皮細(xì)胞TLR4表達(dá)的影響；2、研究青心酮對(duì)激活的血管內(nèi)皮細(xì)胞11Bα蛋白含量的影響；3、研究青心

3、酮對(duì)激活的血管內(nèi)皮細(xì)胞TNF．Q分泌量的影響。 結(jié)果：(1)10—7mol／L，10一6mol／L和10一5mol／L青心酮可顯著減少LPS刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304TLR4mRNA和蛋白的表達(dá)量(P<0．05)，并且呈一定劑量依賴性； (2)10—7mol／L，10一6mol／L和10一5mol／L青心酮能顯著抑制LPS誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304IrBa蛋白的降解(P<0．05)，即抑制NF-r~B的活

4、化。而1O-7mol／L青心酮干預(yù)組與l0'6mol／L青心酮干預(yù)組相比，Ir,Bα蛋白表達(dá)量無明顯差異(P>O．05)；(3)10一7mol／L，10一6mol／L和10一5mol／L青心酮對(duì)LPS誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304TNF-a分泌的具有顯著的抑制作用(P<0．05)。而10'Smol／L青心酮干預(yù)組與10-6mol／L青心酮干預(yù)組相比，ECV-304細(xì)胞TNF．Q分泌量無明顯差異(P>0．05)。 結(jié)論：青心酮