酪絲亮肽對肝癌肺轉(zhuǎn)移的治療作用.pdf

1、目的:
　　 觀察三肽化合物酪絲亮肽（Tyroserleutide，YSL）對人肝癌細胞肺轉(zhuǎn)移的抑制作用，初步探討其抑制肝癌細胞肺轉(zhuǎn)移的機制。
　　 方法:
　　 1.采用尾靜脈接種人肝癌細胞的方法建立裸鼠肝癌細胞的肺轉(zhuǎn)移模型來觀察YSL對肝癌細胞肺轉(zhuǎn)移的抑制作用。
　　 2.應(yīng)用Transwell小室實驗?zāi)Ｐ陀^察不同濃度的肺組織粗提物對肝癌細胞MHCC97H和SK-HEP-1的誘導能力，尋找最佳誘導濃度

2、。
　　 3.應(yīng)用Transwell小室實驗?zāi)Ｐ陀^察YSL對肺組織粗提物誘導的體外培養(yǎng)的兩種人肝癌細胞株侵襲能力的影響。
　　 4.應(yīng)用明膠酶譜分析法，觀察YSL對經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細胞株細胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs) MMP-2和MMP-9蛋白活性的影響。
　　 5.應(yīng)用免疫印跡技術(shù)觀察YSL對經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細胞株細胞中M

3、MP-2和MMP-9蛋白表達的影響。
　　 6.應(yīng)用實時熒光定量PCR法觀察YSL對經(jīng)肺組織粗提物培養(yǎng)的兩種人肝癌細胞株細胞中MMP-2和MMP-9 mRNA水平的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1.YSL可以顯著抑制裸鼠體內(nèi)肝癌細胞轉(zhuǎn)移至肺內(nèi)的腫瘤灶數(shù)。
　　 2.不同濃度肺組織粗提物誘導人肝癌細胞的移動侵襲實驗中，在一定濃度范圍內(nèi)隨著肺粗提物濃度的提高其穿過下室的細胞數(shù)增多，與培基對照組比較具有顯著差異。

4、
　　 3.YSL可以顯著抑制經(jīng)肺組織粗提物誘導的細胞的體外侵襲能力。
　　 4.YSL可以顯著抑制肝癌細胞培養(yǎng)上清中MMP-2和MMP-9的蛋白活性。
　　 5.YSL可以顯著抑制肝癌細胞中MMP-2和MMP-9的蛋白表達水平。
　　 6.YSL可以顯著抑制肝癌細胞中MMP-2和MMP-9的mRNA表達水平。
　　 結(jié)論:
　　 YSL具有抑制肝癌細胞肺轉(zhuǎn)移的作用。體外研究表明肺組織粗提