米諾環(huán)素對(duì)腦缺血再灌注模型中ICAM-1的抑制作用及探究其與HMGB-1的關(guān)系.pdf

1、目的:觀(guān)察米諾環(huán)素在腦缺血再灌注模型中對(duì)細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)和高遷移率族蛋白(highmobility group box-1 protein,HMGB-1)水平的影響及探究HMGB-1及ICAM-1之間的關(guān)系。
　　 方法:采用Koizumi's method建議的絲線(xiàn)方法,建立大腦中動(dòng)脈梗死模型,缺血時(shí)間90分鐘后再灌,用3％水合氯醛按體重腹腔內(nèi)注

2、射麻醉。由山西醫(yī)科大勞動(dòng)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室提供的健康雄性清潔SD大鼠80只,體重250±50g,按完全隨機(jī)方法分成四組分別是假手術(shù)組,模型組,米諾環(huán)素治療組1(10mg/kg)和米諾環(huán)素治療組2(15mg/kg)。在再灌后12小時(shí)開(kāi)始用藥,每日一次,持續(xù)用7天。每組在術(shù)后1、3、5、7天分別處死5只,將損傷側(cè)腦組織均漿稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。為了消除總蛋白因素的影響,我們先用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定總蛋白濃度,然后分別用ELISA酶聯(lián)免疫分析法進(jìn)行ICAM-1

3、和HMGB-1的測(cè)定(試劑盒為Sigma公司提供),將各自值比上總蛋白濃度得到其所占比例,我們將分析比較這一比值的變化。運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)結(jié)果描述用均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差表示,多組比較符合方差齊性者用方差分析,否則用K-W秩和檢驗(yàn),兩組比較當(dāng)正態(tài)性及方差齊性時(shí)用t檢驗(yàn),符合正態(tài)性但方差不齊時(shí)用矯正后的t檢驗(yàn)。探究HMGB-1和ICAM-1兩者關(guān)系應(yīng)先繪制散點(diǎn)圖,然后視其為線(xiàn)性或者非線(xiàn)形關(guān)系來(lái)決定分析方法。
　　 結(jié)果:模型組

4、與假手術(shù)組之間的ICAM-1和HMGB-1差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的(P＜0.05)。7天中模型組米諾環(huán)素組1米諾環(huán)素組2各組總體ICAM-1的統(tǒng)計(jì)學(xué)描述為,模型組3.430±0.766,米諾環(huán)素1組是2.813±0.272,米諾環(huán)素2組為2.587±0.251。米諾環(huán)素在術(shù)后7天總體上能減少腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達(dá),且在這次實(shí)驗(yàn)中該抑制作用符合劑量依賴(lài)的正向關(guān)系(經(jīng)過(guò)levene法檢驗(yàn)為方差不齊,選用K-W秩檢驗(yàn),總體比較比較P

5、值都小于0.05),推斷這3組總體之間差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的。進(jìn)而選用Bonferroni法進(jìn)行組間比較(a'取0.0167),得出各組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值小于0.0167),說(shuō)明米諾環(huán)素對(duì)腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達(dá)有抑制的作用,且在這次實(shí)驗(yàn)中這種作用與米諾環(huán)素劑量呈正相關(guān)系(Z0.1658=2.13,a'=0.0167,Z23=2.390,Z24=4.472,Z34=2.155,各組間比較P值均小于a')。7天中總體能

6、減少腦缺血再灌注損傷后HMGB-1的表達(dá),各組分布近似正態(tài)分布,統(tǒng)計(jì)學(xué)描述為模型組27.552±2.297,米諾環(huán)素1組23.909±2.893,米諾環(huán)素2組21.832±2.593。方差齊性檢驗(yàn)P為0.525＞0.10,方差分析結(jié)果P＜0.001,各組間比較LSD法各組P值均小于0.05。在第7天時(shí)對(duì)ICAM-1的抑制作用研究時(shí)資料提示各組數(shù)據(jù)方差齊(P值大于0.10),組間比較提示各組間比較P值＜0.001,提示各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義,可以認(rèn)為劑量不同時(shí),可以產(chǎn)生對(duì)ICAM-1不同的影響,且結(jié)合統(tǒng)計(jì)描述容易得知,這種抑制是呈劑量依賴(lài)正相關(guān)的。在第7天時(shí)米諾環(huán)素對(duì)HMGB-1的抑制作用資料提示,各組間的差異是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的(P值小于0.05)。在模型組和米諾環(huán)素處理組1中,術(shù)后第3天時(shí)HMGB-1和ICAM-1的回歸關(guān)系在檢驗(yàn)水準(zhǔn)是0.10的情況下是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的,兩者較符合二次方和三次方的關(guān)系,方程為米諾環(huán)素1組Y=-0.096X2+4.474X-49.274,模

8、型組y=-0.026X2+1.414X-15.473,按a=0.10的檢驗(yàn)水準(zhǔn),P＜0.10,回歸方程是有意義的。
　　 結(jié)論:這次研究表明米諾環(huán)素可以抑制腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達(dá),在術(shù)后第7天米諾環(huán)素對(duì)腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達(dá)有抑制作用。米諾環(huán)素素還可以抑制同過(guò)程中HMGB-1的表達(dá)。上述抑制作用在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中均與米諾環(huán)素劑量呈正向變化關(guān)系。其中,在損傷后第3天的模型組和米諾環(huán)素處理1組中,HMGB-1與