核內巨噬細胞集落刺激因子作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)又稱為集落刺激因子-1,是造血系統(tǒng)重要的細胞因子.為研究核內M-CSF的功能,該文采取定位表達的方法使M-CSF在細胞核內表達,研究對細胞功能的影響.該文采用了真核表達質粒pCMV/myc/nuc,該質粒在插入片段末端連接三個核定位信號(NLS)編碼序列,使表達的重組蛋白C端融合三個NLS信號肽,賦予重組蛋白強入核信號從而定位表達于核內.該文選取兩株永生細胞系:小鼠成纖維母細胞系NIH3T3和人EB病毒

2、轉化的類淋巴母細胞系LCL-H,通過轉染和G418篩選、建立穩(wěn)定表達核M-CSF的細胞系以研究核M-CSF對細胞生物學活性的影響.腫瘤細胞的另一特性是逃逸凋亡.用細胞毒藥物阿霉素處理細胞,檢測細胞表面PS(凋亡)和碘經(jīng)丙錠(PI)染細胞核(死亡)研究細胞的調亡情況.結果表明LCL-M比對照細胞的抗凋亡能力高.提供自我生長信號,對生長抑制信號失敏,凋亡逃逸,組織浸潤和轉移,持續(xù)的血管新生和無限的復制增生是惡性細胞共有的特征.該文對兩種細胞

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