依那普利拉抑制瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、前言:
　　 瘢痕疙瘩(keloid)是皮膚損傷后引發(fā)膠原異常積聚所致的過(guò)度瘢痕化。與增生性瘢痕不同,典型的瘢痕疙瘩無(wú)明顯誘因或僅有輕微創(chuàng)傷,但瘢痕組織表現(xiàn)為過(guò)度生長(zhǎng),超過(guò)原傷口界限,侵犯鄰近組織,呈瘤樣增生,故有“蟹足腫”之稱。其臨床表現(xiàn)為感覺(jué)異常、瘤樣增生;患者需面對(duì)一系列生理、心理、美容及社會(huì)問(wèn)題。至今為止,瘢痕疙瘩的治療仍很復(fù)雜和困難。臨床單純手術(shù)切除后極易復(fù)發(fā),治療效果不佳。目前雖然不能確定其確切的發(fā)病機(jī)制,也無(wú)滿意的

2、治療藥物,但大量研究證明瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞參與該病的發(fā)生。
　　 依那普利拉(Enalaprilat)是血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin convertingenzyme inhibitors,ACEI)的一種,是由依那普利在體內(nèi)水解后的活性代謝產(chǎn)物,已有許多的研究報(bào)告描述了血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依那普利對(duì)于心肌梗死的作用,例如可以降低左心室膠原蛋白含量和減弱左室重構(gòu),改善心室功能。近年來(lái)有研究表明血管緊張素轉(zhuǎn)換酶

3、抑制劑有抑制成纖維細(xì)胞增殖和膠原蛋白的合成和分泌的功能。P27kipl(Cyclin dependent kinase inhibit,CKI)是一種廣譜的周期蛋白依賴性激酶抑制劑,通過(guò)影響細(xì)胞周期基本過(guò)程來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察依那普利拉對(duì)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖及P27kipl表達(dá)的影響,探討依那普利拉(Ena)對(duì)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的作用及作用機(jī)制,為瘢痕疙瘩的治療提供新的思路。
　　 材料

4、和方法:
　　 一、實(shí)驗(yàn)材料
　　 (一)病例與標(biāo)本:
　　 所有病例均來(lái)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科門(mén)診確診的患者,標(biāo)本為手術(shù)切除的瘢痕疙瘩組織。
　　 (二)主要試劑:
　　 AngⅡ、四氮唑鹽(MTT)、特異性鼠抗人P27kipl蛋白單克隆抗體、依那普利拉、RPMI1640培養(yǎng)基、胎牛血清(FCS)
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 以培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?實(shí)驗(yàn)分為

5、對(duì)照組,AngⅡ組,3個(gè)劑量的Ena用藥組,采用組織塊貼壁法進(jìn)行培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,四氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖;免疫組化SP法檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑P27kipl(Cyclin dependent kinase inhibitor,CKI)表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 Ena能夠抑制AngⅡ誘導(dǎo)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞增殖,使P27kipl表達(dá)增強(qiáng)
　　 結(jié)論:
　　 En