大鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎滑膜巨噬細(xì)胞MR成像的初步研究.pdf

1、目的：
　　在建立大鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)模型的基礎(chǔ)上，靜脈注射超微超順磁性氧化鐵(USPIO)，在7.0T小動(dòng)物磁共振掃描儀上行磁共振(MR)掃描，比較注射前后膝關(guān)節(jié)滑膜信號(hào)變化，初步探討大鼠CIA關(guān)節(jié)滑膜巨噬細(xì)胞MR成像的可行性。
　　方法：
　　60只雄性Wistar大鼠隨機(jī)選取10只作為正常對(duì)照組，其余用于造模。造模大鼠選取尾根部至背部4～6個(gè)點(diǎn)皮下注射雞Ⅱ型膠原(CⅡ)與完全弗氏佐劑(CFA)的乳劑0.5

2、ml/只，一周之后等量膠原乳劑皮下注射加強(qiáng)免疫以構(gòu)建CIA模型，正常對(duì)照組大鼠相同部位、相同時(shí)間皮下注射等量生理鹽水。造模成功大鼠(AⅠ≥6)隨機(jī)分為模型早期組、模型中期組、模型晚期組，每組10只。模型早、中、晚期組及正常對(duì)照組大鼠分別于免疫后第14天、28天和42天經(jīng)尾靜脈注射USPIO，注射前及注射24小時(shí)后分別在7.0T小動(dòng)物磁共振掃描儀上行膝關(guān)節(jié)T1WI、T2WI和T2*WI序列MR掃描。對(duì)MR圖像進(jìn)行定性和定量分析，應(yīng)用軟件測(cè)

3、量感興趣區(qū)(ROI)的信號(hào)強(qiáng)度(SI)，根據(jù)相應(yīng)公式計(jì)算得到滑膜信噪比(SNR)、滑膜/肌肉對(duì)比信噪比(CNR)及滑膜增強(qiáng)前后SNR變化(△SNR)。第二次MR掃描結(jié)束之后處死大鼠，留取雙側(cè)膝關(guān)節(jié)滑膜，中性福爾馬林固定24小時(shí)后石蠟包埋制成切片，行常規(guī)HE染色觀察滑膜增生、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理情況，普魯士藍(lán)染色觀察滑膜組織中鐵的分布以及CD68免疫組化染色觀察滑膜組織中陽(yáng)性巨噬細(xì)胞并對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析

4、。
　　結(jié)果：
　　(1)造模成功大鼠共32只，成功率64％(32/50)，免疫后第12天開(kāi)始發(fā)病。
　　(2)造模前模型早、中、晚期組與正常對(duì)照組大鼠體重、足爪容積比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)：造模后隨著造模時(shí)間延長(zhǎng)，模型組大鼠體重明顯輕于正常對(duì)照組(P<0.01)，模型組大鼠足爪容積明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)。模型組大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)(AⅠ)評(píng)分隨造模時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高。
　　(3)在USPIO增強(qiáng)前

5、MR圖像上，模型早、中、晚期組大鼠膝關(guān)節(jié)可見(jiàn)不同程度滑膜增厚，關(guān)節(jié)積液。在USPIO增強(qiáng)后T1WI序列上各模型組大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織均未見(jiàn)明顯信號(hào)改變，滑膜SNR和滑膜/肌肉CNR增強(qiáng)前后比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；在USPIO增強(qiáng)后T2WI、T2*WI序列上各模型組膝關(guān)節(jié)滑膜組織可見(jiàn)信號(hào)不均勻降低(負(fù)增強(qiáng)效應(yīng))，滑膜SNR和滑膜/肌肉CNR增強(qiáng)前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。T1WI、T2WI、T2*WI各掃描序列上模型早、

6、中、晚期組滑膜增強(qiáng)前后ASNR組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。正常對(duì)照組大鼠膝關(guān)節(jié)在USPIO增強(qiáng)前后MR圖像上未見(jiàn)明顯滑膜增厚及信號(hào)改變。
　　(4)大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織HE染色光鏡下見(jiàn)模型組顯示滑膜炎癥；普魯士藍(lán)染色模型組滑膜中可見(jiàn)大量染色鐵顆粒沉積，主要分布于巨噬細(xì)胞內(nèi)；CD68免疫組化染色模型組滑膜中可見(jiàn)較多陽(yáng)性巨噬細(xì)胞。正常對(duì)照組大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織HE染色和普魯士藍(lán)染色未見(jiàn)滑膜炎癥及明顯染色鐵顆粒分布，CD68免疫組