高壓氧對大鼠持續(xù)性局灶腦缺血后Bcl-2蛋白表達的影響.pdf

1、一 王中文摘要目的觀察 H B O對持續(xù)性局灶腦缺血的 影響。 從缺血后細胞凋亡及凋亡相關(guān)基因B c l - 2 蛋白 表 達等 方面 研究 H B O對持續(xù) 性局灶 腦缺血的 作用及其相關(guān)機制。為H B O治療合理地應(yīng)用于I V C D提供實驗依據(jù)。方法1 . 健 康雄 性 S D大鼠 6 5只， 隨 機分為 假手 術(shù)組、 缺血對照 組、 缺 血十 高 壓氧組 ( H B O ) 、 缺血+ 高 壓空 氣組 ( H A ) ， 后三大

2、組 分5 組 ( n = 4 ) ， 分 別對應(yīng)6 h ,2 4 h , 4 8 h , 7 2 h , 7天時間 點。 麻醉 成功 后應(yīng)用 線栓法 制作局灶性腦缺血大鼠模型。 在缺血后 3 h分別給予 H B O ( 2 A T A , 1 . 5 h ) 、 高壓空氣( H A ) 或不予處理因素作為對照組。 各組大鼠 分別于相應(yīng)時間點常規(guī)取材、固 定、 切片。2 . 常規(guī) H E染色， 計算 H B O處死組梗塞灶體積，

3、比 較 H B O組和缺血對照組及高 壓空氣組的 梗塞灶大小。3 免疫組織化學(xué) S P法檢測 B c l - 2 蛋白 表達， 記數(shù)其中b c l - 2 免疫組化陽 性細胞， 計算陽性細胞密度。結(jié)果1 持續(xù)性局灶腦缺血 6 h H E染色光鏡下可見梗塞灶形成。梗塞灶局限于左側(cè)大腦中動脈供血區(qū)的皮層、 皮層下和部分基底節(jié)。 H B O組 7 天大鼠 梗塞灶體積明 顯小于缺血對照組，而高壓空氣組與缺血對照組無明顯差異。2 ‘ 持續(xù)性局灶腦

4、缺血模型B c l - 2 蛋白 表達主要位于梗塞灶鉤緣區(qū) 域， 梗塞灶中心區(qū)和 遠離梗塞 灶的區(qū) 域未見陽 性細胞。 免疫組化陽 性信號主 要位于 胞漿，而 神 經(jīng)細胞的 軸丘處無陽 性信號。3 . 持續(xù)性局灶腦缺血6 h 到7 天梗塞灶邊緣區(qū) 域都有B c l - 2 蛋白 表達， 缺血2 4 h到7 2 h 為表達高峰。 H B O組與缺血對照組比 較缺血 4 8 h , 7 2 h , 7 天陽 性細胞密度增加，差異有顯著性

5、意義，而高壓空氣組與缺血對照組無明顯差異。結(jié)論1 . 持續(xù)性局灶腦缺血早期開始進 H B O治療，可減輕大鼠缺血性腦損傷，表現(xiàn)_ 蘭A b s t r a c tO b j e c t i v e1 . T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t a n d m e c h a n i s m o f H B O t r e a t m e n t o n b r a i

6、n o f a d u l t r a t sf o l l o w i n g p e r m a n e n t f o c a l c e r e b r a l i s c h e m i a .Me t h o d s1 . t h e r a t m o d e l s o f p e r m a n e n t f o c a l c e r e b r a l i s c h e m i a

7、 w e r e i n d u c e d b yi n t r a l u m i n a l f i l a m e n t o c c l u s i o n t o t h e m i d d l e c e r e b r a l a r t e r y . 3 h a f t e r i s c h e m i a ,e x p e r i m e n t a l g r o u p s w

8、e r e t r e a t e d w i t h H B O ( 2 A T A , 1 . 5 h ) o r H A ( 2 A T A , 1 . 5 h ) o rn o t h i n g .2 . T h e s i z e o f i n f a r c t o n c o r o n a l s e c t i o n w a s d e t e c t e d b y i m a

9、 g e a n a l y s i s s y s t e mf o r c a l c u l a t i n g t h e v o l u m e o f i n f a r c t .3 . I m m u n o h i s t o c h e m i s t r y a n d p i c t u r e a n a l y s e s w e r e u s e d t o o b s e

10、r v e t h ee x p r e s s i o n o f B c l - 2 p r o t e i n w i t h t h e l e n g t h e n i n g o f i s c h e m i c t i m eRe s u l t s1 . T h e i n f a r c t l e s i o n w a s f o u n d a t 6 h o f i s

11、 c h e m i a . H B O t r e a t m e n t f o r 7 d a y s a f t e ri s c h e m i a d e c r e a s e s t h e i n f a r c t v o l u m e s i g n i f i c a n t l y . Wh i l e t h e r e i s n os i g n i f i c a n t

12、 l y d i f f e r e n c e b e t w e e n H A t r e a t m e n t g r o u p a n d c o n t r o l g r o u p .2 . I n t h e r a t m o d e l s o f p e r m a n e n t f o c a l c e r e b r a l i s c h e m i a , t

13、h e e x p r e s s i o n o f B c l - 2p r o t e i n w a s m a i n l y l o c a t e d a t t h e b o r d e r z o n e o f i n f a r c t . T h e p o s i t i v e s i g n a lw a s m a i n l y l o c a t e d i n

14、 t h e c y t o p l a s m .3 . T h e B c l - 2 p r o t e i n s e x p r e s s e d f r o m 6 h t o 7 d a y s o f i s c h e m i a . T h e e x p r e s s i o np e a k e d f r o m 2 4 h t o 7 2 h . T h e s i

15、 g n i f i c a n t i n c r e a s e i n e x p r e s s i o n o f B c l - 2 p r o t e i ni n r a t s t r e a t e d w i t h H B O w a s o b s e r v e d a t 4 8 h , 7 2 h a n d 7 d a y s c o m p a r e d w

16、i t ht h a t o f c o n t r o l g r o u p ，C o n c l u s i o nl . T h e e f f e c t o f H B O t r e a t m e n t o n c e r e b r a l i s c h e m i a o f a d u l t r a t m a y b en e u r o p r o t e c t i v

17、e .2 . H B O m a y r e d u c e i s c h e m i c i n j u r y p a r t i a l l y t h r o u g h t h e u p r e g u l a t i o n o f B c l - 2a n d i n h i b i t i o n o f t h e n e u r o n a l a p o p t o s i s