兔骨髓間充質干細胞穴位移植對梗死區(qū)心肌細胞再生及其凋亡的影響.pdf

1、目的：探討兔骨髓間充質干細胞(MSCs)穴位移植對缺血心肌細胞的修復重建能力，并進一步研究MSCs穴位注射對梗死區(qū)心肌細胞凋亡的影響及凋亡調控蛋白Fas，F(xiàn)asL，Bcl-2表達的影響。 方法：將已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔隨機分為3組，模型對照組、穴位注射干細胞組、穴位注射生理鹽水組。用開胸結扎冠狀動脈前降支的方法建立急性心肌梗死模型，1周后穴位注射干細胞組經(jīng)穴位注射已經(jīng)分離，培養(yǎng)，擴增、標記后的MSCs懸液，穴位注射生理

2、鹽水組經(jīng)穴位注射等量的生理鹽水。對梗死區(qū)進行Brdu免疫組化染色以觀察穴位移植MSEs是否遷移至梗死區(qū)；對Brdu染色陽性的細胞復染心肌特異性肌鈣蛋白T染色以觀察遷移的細胞是否分化及分化的性質；采用脫氧核苷酸末端轉移酶介導原位缺口標記(TUNEL法)確定細胞凋亡數(shù)，免疫組化SABC方法觀察心肌細胞中Fas、FasL、Bcl-2的表達。 結果：(1)穴位注射MSCs組梗死區(qū)組織免疫組化brdu染色陽性；梗死區(qū)組織cTnT染色陽性；

3、(2)凋亡細胞的表達，模型對照組和穴位注射生理鹽水組均高于正常對照組P＜0.001，穴位注射干細胞組低于模型對照組和穴位注射生理鹽水組P＜0.05。Fas蛋白的表達，模型對照組高于正常對照組P＜0.05，穴位注射干細胞組和穴位注射生理鹽水組均低于模型對照組P分別＜0.001和0.05，穴位注射生理鹽水組明顯高于穴位注射干細胞組P＜0.001。FasL蛋白的表達，模型對照組和穴位注射生理鹽水組均高于正常對照組P＜0.001，穴位注射干細胞

4、組明顯低于模型對照組P＜0.001，穴位注射生理鹽水組明顯高于穴位注射干細胞組P＜0.001。Bcl-2蛋白表達，模型對照組和穴位注射生理鹽水組均低于正常對照組P＜0.001，穴位注射干細胞組明顯高于模型對照組和穴位注射生理鹽水組P＜0.001。 結論：骨髓間充質干細胞穴位移植，可遷移至梗死區(qū)，并可以在梗死區(qū)分化為心肌樣細胞；穴位移植骨髓間充質干細胞可使梗死區(qū)心肌細胞凋亡數(shù)減少，其機制可能是通過Fas、FasL蛋白的減少、Bcl