豬Callipyge基因的克隆，分析與定位.pdf

1、基因組印記是指一種依賴于親本的基因表達(dá)形式,它導(dǎo)致常染色體上的功能基因單一表達(dá)一個等位基因而不表達(dá)另一個等位基因,造成印記位點(diǎn)的單等位基因表達(dá).基因組印記是基因表達(dá)的一種正常過程,并且已在哺乳動物和植物中發(fā)現(xiàn)了很長一段時間.雖然印記基因只占有所有人類基因的5﹪,但是它們在胚胎的生長和行為的發(fā)育都起到了關(guān)鍵作用.在1983年,在奧克拉荷馬州的陶賽特羊群中降生了一只公羊,它的臀部表現(xiàn)出明顯的肌肉肥大現(xiàn)象,它的后代也表達(dá)這樣的表型.這種表型被

2、命名為callipyge(Greek:Calli-beautiful+-pygebuttock).它能夠極大的影響肌肉的發(fā)育,屠體的組分、形狀和肉質(zhì),并且能夠提高飼料利用率,降低采食量.只有遺傳了來源于父本的CLPG突變的雜合子個體才能表達(dá)這一表型,因此推測這一性狀受印記基因的控制.2002年,Freking等人發(fā)現(xiàn)了一個位于GTL2基因上游32.8kb的A→G的突變,這一突變位于一個新發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄本CLPG1內(nèi)部,它是callipyge

3、羊和正常羊的唯一不同之處.而這一新的轉(zhuǎn)錄本CLPG1可能是一個長調(diào)控元件的一部分.在該實(shí)驗(yàn)中,我們選取了4頭在臀部具有明顯肌肉肥大表型的豬和4頭正常豬,并從它們的背最長肌中提取了總RNA,通過RT-PCR的方法得到了部分CLPG1的序列,但是我們并沒有得到A→G的單堿基突變.然后我們篩選了該實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的BAC文庫,獲得兩個BAC克隆.并根據(jù)這個兩個BAC測得了CLPG1周圍約1100bp的序列.最后我們通過篩選法國農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供的IMp