豬H3K9乙?；揎椉捌鋵SHR表達調控的影響.pdf

1、卵泡刺激素(FSH)是由動物垂體前葉嗜堿性細胞合成和分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，是促進和維持性腺正常發(fā)育和生殖功能的重要激素.FSH的生理功能是通過分布于性腺上的特異性受體—卵泡刺激素受體(FSHR)所介導的。FSH受體的表達要受許多旁分泌/自分泌的因素或者啟動子區(qū)域調控元件調節(jié)的影響。因此，研究包含調控元件在內的FSHR基因5'側翼區(qū)域是很重要的。人們已經克隆出很多物種的FSHR的啟動子區(qū)，包括人，大鼠，小鼠和羊，關于豬的FSHR啟

2、動子區(qū)的研究還很少。
　　 染色體是由核小體組成的。核小體上組蛋白的表觀遺傳修飾可以改變基因的表達，而且越來越引起人們的關注。有研究指出，雄性動物中的FSHR的組蛋白甲基化的修飾可以引起基因表達的改變.關于乙酰化，我們可以利用染色質免疫沉淀技術來研究其與FSHR表達調控之間的關系。本實驗結果主要有:
　　 1.豬FSHR缺失啟動子活性分析
　　 對染色質步移得到的FSHR5'區(qū)序列進行分析，發(fā)現沒有TATA框，并

3、且生物信息學分析沒有發(fā)現CpG島。將不同長度的啟動子片段克隆到pGL3-basic質粒上。將質粒轉染到顆粒細胞中。根據缺失啟動子活性檢測結果發(fā)現，最長的片段P1590，即相對轉錄起始位點-1557到+32的區(qū)域在顆粒細胞中的活性與pGL3-Basic載體相比有2.07倍。-1557到-1159的缺失導致其表達活性是P1590的3.03倍(P＜0.01)。-1159到-562更長片段啟動子的缺失導致其活性相比P1185載體明顯下降。所以從

4、含有核苷酸-1159到-562的片段為啟動子區(qū)重點調控區(qū)域，可能存在著重要調控元件。
　　 2.H3K9乙酰化修飾與FSHR基因表達調控的相關性研究
　　 分別通過體內實驗和體外實驗來研究H3K9乙?；揎椗cFSHR表達的關系。體內實驗中，健康卵泡FSHR啟動子區(qū)乙?；奖乳]鎖卵泡中高，FSHR表達量也比閉鎖卵泡高;體外實驗中，分別用FSH和丁酸鈉來處理顆粒細胞，可以發(fā)現H3K9乙?；揎椝缴?，FSHR基因表達量也