貝克曼庫爾特血細胞分析vcs技術

1、白細胞五分類VCS技術,從三分類到五分類,三分類：淋巴細胞單核細胞粒細胞 中性粒細胞 嗜酸細胞 嗜堿細胞,五分類：淋巴細胞單核細胞中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞,,,,,淋巴細胞,單核細胞,粒細胞,,,,,,淋巴,嗜堿,單核,嗜酸,中性粒細胞,五分類VCS技術,運用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點,對通過的單列白細胞，進行逐個的、同時的、三重的檢測，以及三維分析,以確定其亞群性質。V-低

2、頻波，分析細胞體積；C-高頻波，分析細胞核型；S-激光，分析細胞的顆粒特性。,接近原態(tài)的WBC分析,Scatter Pak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細胞: 紅細胞溶解劑通過滲透壓差溶解紅細胞保持白細胞原態(tài): 溶解終止液令白細胞恢復到“接近原態(tài)”大小,接近原態(tài)的WBC分析,接近原態(tài)的白細胞,,,進入流式通道,混合池和流式通道,接近原態(tài)的WBC分析：前處理裝置,流體動力聚焦,流體動力聚焦的流式通道單細胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過流式

3、通道將重疊限制到最低限度,正常壓力差：標本壓力小于鞘流壓力,,異常壓力差：標本與鞘流壓力差過小,VCS檢測,八千多個白細胞逐個、直接、同時地在流式通道內(nèi)接受VCS三重檢測，得到各自的三維座標值,VCS,,,,增強型流式通道,VCS增強型流式通道運用三種獨立的能量探針來分析細胞,是目前最全面先進的分析工具,更好的體積測量方法,V 是以庫爾特原理檢測細胞的體積獲得的是完全的細胞體積,VCS - DC,更好的細胞內(nèi)部結

4、構測量方法,C 運用高頻探針檢測細胞的內(nèi)部結構獲得細胞核復雜程度的信息區(qū)分分葉核和非分葉核細胞,VCS - RF,VCS - Laser,S 是運用一個寬角度的散射范圍（10? -70?）來測量細胞的顆粒特性更好地根據(jù)顆粒特性區(qū)分淋巴細胞、中性粒細胞和嗜酸細胞,更好的細胞顆粒特性測量方法,逐個、同時、直接的三維檢測,NEDC Mean,細胞的三維定位,NEOP Mean,NE RLS Mean,三維分析技術,將檢測過的8,192個

5、細胞分布到一個以V、C、S為三維坐標的空間內(nèi)，顯示出細胞群特征。高智能的計算機軟件分析分析細胞群的位置、相對密度、輪廓、和大小。三維坐標的數(shù)據(jù)分析位點多過 16 × 106個。,三維細胞定位,三維空間的多側面表示-DF1 -體積(V),激光散射(S),,,,,,嗜酸細胞,中性粒細胞,淋巴細胞,單核細胞,DF2 -體積(V),傳導性(C),,,,,單核細胞

6、,淋巴細胞,中性粒細胞嗜酸細胞嗜堿細胞,十余種異常細胞的報警提示,VCS三維分析的技術特點,接近原態(tài)的白細胞分析一個分類試劑包增強型流式通道，VCS直接、同時、三重檢測分析細胞的視角與手工相似真正的三維檢測VCS，匯集最全面的物理檢測工具三維分析的高分辨率 (256 ? 256 ? 256)白細胞五項分類10多種異常細胞的檢測,,VCS三維分析的技術特點,流體動力聚焦 統(tǒng)計8000多個白細胞分類結果與手工的相

7、關性好流式通道還可檢測網(wǎng)織紅細胞被世界上最多實驗室采用的五分類原理,,,,,,,,,IntelliKineticsTM（智能調(diào)控) & AccuGateTM（精確定位）,兩種新技術令報警的假陽性和假陰性減少到前所未有的水平,VCS三維技術的優(yōu)化,,,,,專利的IntelliKinetics? 技術,對標本在測量前的預處理作最適化控制根據(jù)實驗室環(huán)境溫度，控制儀器內(nèi)細胞與試劑的反應溫度試劑加入量試劑與細胞的反應時

8、間從流式通道獲取數(shù)據(jù)的時間,先進的標本預處理技術,,,,,專利的 AccuGate? 定位技術,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,AccuGate? 定位技術,真正的三維分析全周邊限定細胞亞群對細胞特征進行實時刻劃每個細胞亞群都獨立定義清晰的細胞亞群分界超凡的懷疑性報警靈敏度和特異性標本具48小時的分類穩(wěn)定性。,,,,,,以嶄新方式展示白細胞分類數(shù)據(jù),從一個分類點圖上了解更多信息,轉動 – 從任意角度觀察,根據(jù)需要隱藏

9、/顯示細胞亞群,,,,,AccuGate? 定位技術,增加新的懷疑性報警提示懷疑有中性、淋巴、或單核系原母細胞分辨不同細胞系的原母細胞 衰老標本低細胞數(shù)量標本(絕對值),,,,報警語更為準確和精確,經(jīng)典的庫爾特專利技術 。---蠕動搖床 .,全自動90度搖勻吸樣前自動設置初始化編號唯一具備樣本識別無錯管理,256 X 256 X 256,,,,,,,,,淋巴,單核,嗜酸,中性,充滿信心的最低人工復檢率,獨有的非線性分類方

10、式柔變輪廓細胞亞群多維參數(shù)的精確演算原始細胞的特征描述精確的報警,Coulter® HmXTM非線性柔變輪廓分類(AccuGate) .,對異常標本最精確的檢測及結果報告對重疊及被掩蓋的群落進行精確分類激發(fā)軟件對分類結果異常的樣本進行進一步分析超凡的懷疑性報警靈敏度和特異性標本具有更好的分類穩(wěn)定性增加新的懷疑性報警提示大大降低假陽性率和假陰性率,Coulter® HmXTM非線性柔變輪廓分類(

11、AccuGate) .,Coulter® HmXTM智能動力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,,在任何一種血細胞分析儀的分析過程中， 細胞與試劑之間的反應過程都對結果的準確度起到至關重要的作用。細胞和溶血劑的反應（物理法）細胞和染色劑的反應（化學法）,?根據(jù)實驗室環(huán)境條件，調(diào)整： ?加入試劑的溫度 ?加入試劑的量 ?試劑與細胞的反應時間（從流式通道獲取數(shù)據(jù)的時間）?屏蔽分析環(huán)

12、境的內(nèi)、外源噪音,Coulter® LH 755TM智能動力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,消除實驗室環(huán)境對結果的影響保證在不破壞白細胞的前提下,完全溶解紅細胞保證白細胞恢復原態(tài)更精確的結果，降低復檢率整體提高實驗室工作效率,Coulter® LH 755TM智能動力系統(tǒng) Intellikinetics TM .,1. 試劑溫度,2. 試劑量,3. 反應時間,,,優(yōu)秀，經(jīng)濟的幼稚細胞檢

13、測,Coulter® HmXTM卓越的幼稚細胞報警功能,基于VCS技術，結合庫爾特非線性柔變輪廓分類技術，COULTER® HmX的研究隊伍根據(jù)國際行業(yè)標準，在結果報告單中提供無與倫比的包括十余種幼稚細胞的準確報警，與同類儀器相比， COULTER® HmX的幼稚細胞功能獨有如下優(yōu)點：基于多維參數(shù)基礎上，結合多種創(chuàng)新科技的準確的、分系的幼稚細胞報警無需額外的試劑，降低實驗室成本根據(jù)國際行業(yè)復檢標準，

14、只提供準確的報警以供人工復檢參考,,,,,NE BlastsImm NE 2Imm NE 1,LY BlastsVariant LY,MO Blasts,NRBCs,,,,,,,,,Coulter® HmXTM卓越的幼稚細胞報警功能,有核紅細胞 單核系原始細胞淋巴系原始細胞粒系原始細胞不成熟粒細胞中性桿狀核細胞異型淋巴細胞過度溶解的淋巴細胞血小板凝集團和巨大血小板細胞寄生蟲(瘧原蟲等),Coul

15、ter® HmXTM卓越的幼稚細胞報警功能,有核紅細胞在HmX上的體現(xiàn).,VCS技術為基礎在散點圖上有單獨的群落報告方式符合國際標準WBC分類不受影響，結果準確最準確的分類結果，最低的假陽性率，假陰性率最低的成本無限擴展性,有核紅細胞,,精敏調(diào)節(jié)系統(tǒng)AccuFlexTM,專利的AccuFlex®軟件技術可以讓您選擇每一項報警的靈敏度水平，由此來建立相應的復檢標準。對您的實驗室而言，庫爾特VCS®

16、;技術平臺與AccuFlex®, AccuGate®, and Intellikenetics® 等技術的組合意味著將復檢率降低到前所未有的水平，同時也意味著以更高的效率完成更大的工作,網(wǎng)織紅細胞計數(shù)是用作紅細胞產(chǎn)生或紅細胞生成的指標，是診斷或監(jiān)測貧血治療最常用的臨床指標 傳統(tǒng)的手工計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的方法因其固有的不精確性，當用做監(jiān)測實驗時有一定的局限性，尤其是用在計數(shù)范圍的低限或高限時。涂片厚薄，染色深

17、淺，有限的細胞計數(shù)以及技師間的差異均會導致結果的變異系數(shù)為25%到50%。 流式細胞術測量網(wǎng)織紅細胞不但大大提高了網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的準確性和精確性，還能提供一些反映網(wǎng)織紅細胞成熟度和大小的非傳統(tǒng)參數(shù)。臨床研究已經(jīng)開始將這些非傳統(tǒng)參數(shù)應用于許多貧血性疾病的診斷和治療,自動網(wǎng)織紅細胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作更簡便,試劑非熒光染料---新亞甲藍來沉淀網(wǎng)織紅細胞內(nèi)的RNA。網(wǎng)織紅細胞染色是為了把網(wǎng)織紅細胞與

18、成熟紅細胞區(qū)分開來。脫蛋白溶液(酸性、低滲)--- 在血液與新亞甲藍混勻孵育一段時間后加入將網(wǎng)織紅細胞內(nèi)的血紅蛋白除去，而保留著色的RNA。紅細胞腫脹成球形但不脹破,自動網(wǎng)織紅細胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作更簡便,方法：漂清本底后，以VCS技術在增強型流式通道內(nèi)對細胞進行分析，即同時采用體積、傳導性和光散射三維分析來確定細胞并將其分類。V:直流電測量的體積確定細胞的大小。網(wǎng)織紅細胞的分析高度依

19、賴細胞的大小信息，根據(jù)定義，未成熟的紅細胞大于成熟的紅細胞。數(shù)據(jù)圖的y軸為體積C:傳導性或射頻測量提供細胞的內(nèi)部特性信息。數(shù)據(jù)圖的z軸為傳導性，它只能在旋轉的三維圖中才可看到S:細胞通過氦-氖激光束測得的光散射提供細胞表面特性和細胞顆粒特性的信息。網(wǎng)織紅細胞分析高度依賴光散射信息因為含有殘余RNA的紅細胞的光散射強于成熟紅細胞的光散射。數(shù)據(jù)圖的x軸為光散射,自動網(wǎng)織紅細胞功能,Coulter® LH750創(chuàng)新科技令操作

20、更簡便,網(wǎng)織紅細胞的檢測,網(wǎng)織紅細胞是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的不成熟紅細胞,通常較成熟紅細胞稍大,其胞質中尚殘存部分嗜堿性物質(RNA,核糖體),經(jīng)堿性染料染色后可見深染的網(wǎng)狀結構,故名。右圖中標記A、B、C的細胞分別代表不同成熟度的網(wǎng)織紅細胞的。,新亞甲藍-VCS檢測法,以經(jīng)典的超活染料新亞甲藍（NMB）著色網(wǎng)織紅細胞內(nèi)殘存的RNA。漂去除紅細胞內(nèi)血紅蛋白(酸性試劑)在流式通道，運用VCS三維技術，將網(wǎng)織紅細胞與成熟紅細

21、胞、白細胞、血小板、和有核紅細胞區(qū)分開來。,網(wǎng)織紅細胞的VCS三維分析,運用VCS三維技術分析染色后的紅細胞。低頻波檢測細胞體積高頻波(阻光性)檢測細胞的內(nèi)部成分，可剔除非紅細胞顆粒激光散射將網(wǎng)織紅細胞與成熟紅細胞區(qū)分開來(網(wǎng)織紅細胞胞漿含較 RNA 物質，散射較多的激光，在散點圖上分布于紅細胞的右側)。網(wǎng)織紅細胞成熟度越差,在散點圖上分布越靠右檢測與白細胞分類共享一個流式通道。,網(wǎng)織紅細胞VCS三維散點圖分析,,,網(wǎng)織紅細

22、胞,,,,,網(wǎng)織紅細胞亞群分辨,網(wǎng)織紅細胞高成熟度網(wǎng)織紅,成熟紅細胞,白細胞,,,,,,非紅細胞干擾,,低成熟度網(wǎng)織紅,網(wǎng)織紅細胞參數(shù)意義,參數(shù) 英文 正常參考網(wǎng)織紅細胞百分比 RET% 0.5% - 2%

23、 2% - 6%網(wǎng)織紅細胞絕對值 RET# (25 – 75) ×109/L網(wǎng)織紅成熟度 IRF 0.2-0.4平均網(wǎng)織紅體積 MRV

24、100-125fl平均球形紅細胞體積 MSCV 84-100fl高散射網(wǎng)織紅百分比 HLR% 0.07%-0.7%高散射網(wǎng)織紅絕對值 HLR# (3 – 50) ×106/L,,,網(wǎng)織紅細胞參數(shù)的臨床意義,IRF的臨床應用未成熟網(wǎng)織紅細胞，也稱移動或張力

25、細胞，正常情況下不足網(wǎng)織紅細胞總數(shù)的5%。未成熟網(wǎng)織紅細胞在大量的促紅細胞生成的刺激下會釋放到外周血中，如出血，某些貧血或對刺激骨髓造血治療的反映。IRF類似于中性粒細胞的核左移，能夠提供額外的紅細胞信息，這些信息可以縮短疾病從診斷到治療或單純的治療時間。IRF在其他方面的臨床應用包括：監(jiān)測骨髓移植后干細胞再生情況監(jiān)測強度化療后骨髓再生情況監(jiān)測鐵、維生素B12和葉酸治療監(jiān)測毒性藥物對骨髓的影響通過促紅細胞生成監(jiān)測腎臟移植對

26、貧血進行分類和評價監(jiān)測新生兒輸血檢測再障危象提高貧血的分類、診斷和治療,不同臨床疾病中IRF與網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的相互關系,IRF—網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù),IRF在骨髓移植病人中的作用，IRF通常先于中性粒細胞計數(shù)對骨髓活性情況出現(xiàn)反應。IRF的優(yōu)點在于它不象中性粒細胞絕對計數(shù)那樣受臨床或亞臨床感染影響。骨髓移植后IRF升高到20%以上時表示紅系移植成功 IRF是骨髓移植成功最敏感的指標，因為IRF升高是當前實驗室方法可測得的最早的

27、反應指標。腎移植后IRF是一個比網(wǎng)織紅細胞絕對計數(shù)更敏感的早期指標,MSCV—平均球形細胞體積,網(wǎng)織紅細胞MSCV與CBC-MCV的關系是遺傳性球形紅細胞增多癥的一個高度有效的指標。Chiron等人評價了286份標本CBC中的平均紅細胞體積（MCV）和MSCV的相關性。由于紅細胞的雙凹圓餅結構，總的相關性顯示出一個MSCV的正向偏差。然而48例MSCV小于MCV的標本有一群不明的細胞亞群。這一亞群包括來自遺傳性球形紅細胞增多（H