典型地域大氣細粒子對細胞毒性和氣道損傷的研究.pdf

1、我國經(jīng)濟欣欣向榮，工業(yè)化和城市化進程越來越快，這給環(huán)境造成了嚴重的污染，其中，大氣污染更是嚴重影響著人們健康，應引起我們的重視，已成為威脅人類健康的主要因素之一。大氣顆粒物對人體健康的影響非常重要，對人類健康構成極大威脅，是近年來大氣污染研究關注的焦點。大氣細粒子(particulatematter)，特別是可入肺顆粒物（顆粒物直徑小于等于2.5微米，PM2.5），越來越成為研究顆粒物對人體健康影響的關鍵問題。本研究主要探討大氣細粒子對

2、細胞毒性及氣道損傷的作用。
　　本研究用玻璃纖維濾膜采集了山東省濟南市的粒徑在2.5微米的大氣顆粒物，用超純水超聲法提取其全顆粒物并配制成不同濃度，以體外培養(yǎng)的人肺上皮細胞(Human lung epithelial cells)為研究對象進行染毒處理，并探討不同濃度的顆粒物對人肺上皮細胞的毒性作用。采用MTT比色法測定細胞的存活率，比色法檢測細胞毒性時釋放的乳酸脫氫酶(LDH)活性;利用X-Gal染色檢測細胞的衰老，利用熒光探針

3、DCFH-DA進行細胞內(nèi)活性氧生成的檢測。動物模型采用Wistar大鼠，隨機分為四組，每組6只，分別為對照組（生理鹽水）、低劑量組(2.5 mg/kg)、中劑量組(5.0mg/kg)和高劑量組(10.0mg/kg)，采用一次性氣管滴注染毒法對4組大鼠進行不同濃度的PM2.5肺部染毒，以1 ml/kg作為滴注量標準，染毒結束24小時后處死實驗動物，取左肺組織，制作病理切片并觀察病理學改變，同時制備右肺的支氣管肺泡灌洗液(BALF)，對BA

4、LF中的免疫細胞分類計數(shù)，同時以熒光顯微鏡檢測肺細胞活性氧(ROS)含量和線粒體膜電位(MMP)的變化，研究大氣細粒子對氣道急性損傷的作用。
　　結果顯示:(1)不同濃度PM2.5對人肺上皮細胞作用24h后，細胞增殖受到影響。PM2.5低濃度時促進細胞增殖，而高濃度時抑制細胞增殖，當PM2.5的濃度較高時，對細胞的毒性作用明顯;隨著PM2.5濃度的升高，細胞乳酸脫氫酶(LDH)的活性也呈上升趨勢，且具有明顯的劑量-效應關系;另外，

5、高濃度的PM2.5對細胞衰老有促進作用。(2)細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平隨PM2.5濃度的升高呈持續(xù)上升趨勢，表明高濃度的PM2.5能誘導細胞發(fā)生氧化應激。(3)肺泡灌洗液中免疫細胞分類計數(shù)結果顯示中性粒細胞明顯增多，吞噬細胞數(shù)量下降，表明高濃度的PM2.5能引起機體的急性炎癥反應;大鼠肺細胞檢測結果顯示，活性氧含量隨PM2.5濃度的升高而明顯增加，線粒體膜電位呈降低趨勢。(4)實驗結果表明，染毒組部分動物的肺組織肺間質變寬變厚，肺間質