快速紫外線-核黃素角膜膠原交聯(lián)治療圓錐角膜和細(xì)菌性角膜炎的基礎(chǔ)和臨床研究.pdf

1、目的:①評估跨上皮快速紫外線/核黃素角膜交聯(lián)法（Tra-CXL）和跨上皮傳統(tǒng)紫外線/核黃素角膜交聯(lián)法（TT-CXL）交聯(lián)兔角膜后不同時期組織病理學(xué)和生物力學(xué)特征改變情況。并與Acc-CXL做相應(yīng)對照研究。②對比Acc-CXL和Tra-CXL臨床治療圓錐角膜的臨床效果。③觀察去上皮快速紫外線/核黃素角膜交聯(lián)法（Acc-CXL）在細(xì)菌性角膜炎中的療效和作用機制，對Acc-CXL聯(lián)合藥物、單純藥物及單純Acc-CXL三種治療方法進(jìn)行對比。

2、r>　　方法:①健康新西蘭大白兔42只，隨機分為3組，分別采用 Acc-CXL、Tra-CXL和TT-CXL交聯(lián)兔眼角膜，于術(shù)后1天、7天和30天取兔眼角膜，行組織病理學(xué)（HE、Masson、?-catenin、CD34，TUNEL）檢查和生物力學(xué)特征評估。②圓錐角膜患者54人，69眼。其中29例患者36眼，行Acc-CXL治療；25例患者33眼，行Tra-CXL治療。分別于術(shù)前、術(shù)后1個月、3個月、6個月和12個月，通過視力、屈光狀態(tài)

3、、眼前節(jié)形態(tài)參數(shù)、生物力學(xué)參數(shù)、內(nèi)皮細(xì)胞密度和共聚焦顯微鏡檢查，評價兩種交聯(lián)方法的臨床治療效果。③新西蘭大白兔60只，角膜基質(zhì)注射金黃色葡萄球菌，制作感染性角膜炎模型，隨機分為4組，分別采用Acc-CXL聯(lián)合藥物、單純藥物及單純Acc-CXL方法處理實驗眼和對照組，并分別于術(shù)后1天、7天和30天取兔眼角膜，進(jìn)行相關(guān)臨床及實驗室檢查。
　　結(jié)果:①交聯(lián)術(shù)后，HE染色3組均致角膜水腫，Acc-CXL組角膜基質(zhì)水腫反應(yīng)最重；Masson

4、染色三組角膜膠原初期排列紊亂，后逐漸恢復(fù)。三組角膜上皮細(xì)胞?-catenin和基質(zhì)細(xì)胞CD34表達(dá)均下降，后逐漸恢復(fù)，1月時?-catenin達(dá)正常水平。三組均造成角膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡，Acc-CXL組凋亡深度最深。三組均未見角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷。三種交聯(lián)方法均能有效增強兔角膜力學(xué)強度， Tra-CXL和 TT-CXL法作用效果相似，均略弱于 Acc-CXL組。②術(shù)前和術(shù)后12個月，Acc-CXL和Tra-CXL組間對比，大多數(shù)參數(shù)無明顯差異。

5、術(shù)后12個月兩組裸眼和矯正視力，角膜曲率和等效球鏡度均較術(shù)前改善。兩組散光度數(shù)，生物力學(xué)特征，角膜最薄點厚度和內(nèi)皮細(xì)胞密度，術(shù)前和術(shù)后12個月均未見明顯差異。共聚焦顯微鏡顯示，術(shù)后1個月兩組前基質(zhì)內(nèi)均可見大量凋亡基質(zhì)細(xì)胞和基質(zhì)水腫樣改變，術(shù)后3個月開始恢復(fù)可見活化的基質(zhì)細(xì)胞，術(shù)后12個月，兩組均已基本恢復(fù)到術(shù)前水平。Acc-CXL組術(shù)后術(shù)眼刺激癥狀明顯，并且術(shù)后haze發(fā)生率約11.11％，Tra-CXL組術(shù)眼僅輕微不適感，未出現(xiàn)haz

6、e表現(xiàn)。③裂隙燈觀察兔眼造模后均能造成角膜潰瘍，各組無明顯差異。術(shù)后30天Acc-CXL聯(lián)合抗菌藥物治療效果，潰瘍評分最低為3.63±1.07。術(shù)后各時期 ELISA標(biāo)記TGF-β1、TGF-β2、IL-6、CollagenⅠ和CollagenⅣ含量；PCR標(biāo)記TGF-β1、TGF-β2、Smad4、CollagenⅠ、a-SMA mRNA的表達(dá)量結(jié)果顯示，Acc-CXL聯(lián)合抗菌藥物效果最佳，單純抗菌藥物治療組次之。
　　結(jié)論:①

7、交聯(lián)后兔角膜上皮和基質(zhì)的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征均有明顯改變，角膜內(nèi)皮均未見損傷。3種交聯(lián)方法均可有效增強兔角膜的生物力學(xué)強度， Tra-CXL和TT-CXL兩組增強效果無顯著差異。② Acc-CXL法與Tra-CXL法術(shù)后12個月視力和角膜形態(tài)改變相似，兩種交聯(lián)方法均達(dá)到臨床應(yīng)用的有效性和安全性。Tra-CXL術(shù)后刺激癥狀輕。③ Acc-CXL聯(lián)合抗菌藥物治療能有效治療金黃色葡萄球菌性角膜炎，治療效果好于單純用藥組和單純Acc-CXL組。