人參銹腐病頡頏放線菌的篩選及鑒定.pdf

1、本研究于2006年至2007年，從吉林省的通化市、靖宇縣和長(zhǎng)白縣三地采集人參根際土樣126份，從中分離出真菌39株、細(xì)菌68株、放線菌232株，對(duì)人參根際的放線菌、真菌、細(xì)菌數(shù)量的變化進(jìn)行了研究。 研究結(jié)果表明，隨著栽參年限的增加，人參根際土壤中微生物數(shù)量呈下降的趨勢(shì)，其中新林土中的微生物數(shù)量最多，老參地中最少；新林土到1年與5年到老參地這兩個(gè)時(shí)間段根際土壤中微生物數(shù)量降低幅度較大。隨著深度的增加，土壤微生物數(shù)量呈下降的趨勢(shì)，其

2、中0～5cm與5～10cm土層間的降低幅度要高于5～10cm與10～15cm土層間；不同年限同一土層的土壤中，微生物數(shù)量不完全遵循下降的趨勢(shì)。 對(duì)分離出的39株真菌、68株細(xì)菌、232株放線菌與人參銹腐病菌進(jìn)行了頡頏試驗(yàn)，結(jié)果表明，39株真菌對(duì)人參銹腐病菌完全沒(méi)有頡頏作用；68株細(xì)菌中僅有3株有頡頏作用，但是作用不大且效果很不穩(wěn)定；232株放線菌中篩選出頡頏效果較好的有9株，據(jù)此對(duì)這9株放線菌進(jìn)行再次篩選。對(duì)這9株放線菌進(jìn)行液體

3、培養(yǎng)，取其發(fā)酵液對(duì)銹腐病菌進(jìn)行頡頏試驗(yàn)，計(jì)算抑菌率，從中選出頡頏效果最好的菌株MS32，頡頏帶寬度為11mm，抑菌率為76.45％。 對(duì)菌株MS32的液體培養(yǎng)條件進(jìn)行了初步研究，主要研究培養(yǎng)基、溫度、pH和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)其發(fā)酵液抑菌效果的影響；并在此基礎(chǔ)上對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行4因素3水平正交試驗(yàn)，最終確定了MS32的最適液體培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基為玉米粉大豆粉培養(yǎng)基、溫度為29℃，pH8，培養(yǎng)時(shí)間為120h。 對(duì)該株放線菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀

4、察和部分生理生化反應(yīng)的測(cè)定，并對(duì)16S rDNA序列進(jìn)行了測(cè)定。形態(tài)學(xué)觀察得出此株放線菌具有典型的鏈霉菌屬的特征，證實(shí)其為鏈霉菌屬。 生理生化反應(yīng)測(cè)定結(jié)果為：菌株MS32使明膠液化，不產(chǎn)生H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纖維素水解；可以利用D～葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作為碳源。 對(duì)MS32的16S rDNA序列測(cè)定，其核苷酸序列長(zhǎng)度為1250bp，將所測(cè)序列與從GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的同源性較高的