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1、目的:研究齊墩果酸(OleanolicAcid,以下簡稱OA)對白血病細(xì)胞株K562凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響。 方法:本實(shí)驗以K562細(xì)胞為研究對象,801μmol/L齊墩果酸為處理因素,采用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的變化、運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax、bcl-xL、bid、c-myc、fas、fasl、faddmRNA表達(dá)水平的變化。 結(jié)果: 1.與空白組和DMSO對
2、照組比較,80μmol/LOA作用K562細(xì)胞后,細(xì)胞生長受到抑制,增殖能力減弱,且有時間依賴性。細(xì)胞表現(xiàn)為:形狀不規(guī)則,部分出現(xiàn)膜皺縮、凋亡小體等凋亡標(biāo)志,而對照組細(xì)胞大小均一,無明顯的增殖抑制和形態(tài)學(xué)變化。 2.與空白組和DMSO對照組比較,80μmol/LOA作用于K562細(xì)胞隨作用時間的增長,可顯著上調(diào)其bax/bcl-2表達(dá)的比值,其中以促進(jìn)bax的表達(dá)為主,而抑制bcl-2的表達(dá)則相對較弱。3.與空白組和DMSO對照
3、組比較,801μmol/LOA作用K562細(xì)胞后,fas基因mRNA表達(dá)高于對照組,而fasl、fadd基因mRNA未見表達(dá)。4.與空白組和DMSO對照組比較,80μmol/LOA作用K562細(xì)胞隨作用時間的延長c=myc、bcl-xLmRNA的表達(dá)量顯著下調(diào)。5.與空白組和DMSO對照組比較80μmol/LOA作用K562細(xì)胞,隨作用時間的延長bid基因mRNA的表達(dá)量顯著上調(diào)。 結(jié)論:齊墩果酸在體外具有抑制白血病K562細(xì)胞
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