“加味二術(shù)散”的制備及其對(duì)仔豬腸道絨毛及腸道微生物菌群的影響研究.pdf

1、本研究根據(jù)中獸醫(yī)臟腑辨證和病因?qū)W說，針對(duì)斷奶仔豬脾胃嬌嫩容易受到寒、濕的侵襲和斷奶肝郁而導(dǎo)致脾虛下瀉的發(fā)病機(jī)理，建立了“抑木扶土，理氣活血”的用藥原則，研制了一種中藥散劑“加味二術(shù)散”，制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行考察，并添加到斷奶仔豬日糧中，主要從斷奶仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，腸道菌群的變化等來探索中藥散劑“加味二術(shù)散”對(duì)斷奶仔豬的影響。具體試驗(yàn)方法及結(jié)果如下:
　　1“加味二術(shù)散”的研制與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定:按處方比例混合中藥材，粉碎，

2、100目過篩，密封保存。分別從外觀均勻度、水分、裝量差異檢查制劑，采用薄層色譜鑒別法對(duì)白術(shù)、蒼術(shù)、柴胡、丹參、陳皮5味中藥進(jìn)行定性鑒別，利用高效液相色譜法測(cè)定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ含量。建立了“加味二術(shù)散”的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　2“加味二術(shù)散”初步穩(wěn)定性的考察:對(duì)3批次“加味二術(shù)散”分別從性狀、鑒別、水分、外觀均勻度、裝量差異、含量測(cè)定等方面進(jìn)行加速穩(wěn)定性及長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究。結(jié)果表明，“加味二術(shù)散”在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)中各檢測(cè)指標(biāo)均無變化，本

3、品在接近藥品的實(shí)際貯存條件的常溫條件下保存12個(gè)月內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定。
　　3添加“加味二術(shù)散”對(duì)仔豬腸道形態(tài)和腸道菌群的影響:選用30日齡斷奶仔豬45頭，隨機(jī)分為3個(gè)處理組，即:不做任何處理的空白對(duì)照組，在基礎(chǔ)日糧中添加0.3％“加味二術(shù)散”的中藥處理組以及在基礎(chǔ)日糧中添加0.5％硫酸粘桿菌素的陽性對(duì)照組，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。在試驗(yàn)開始后第7d、14d、21d分別截取十二指腸、回腸、空腸腸管中部樣品于4％多聚甲醛固定保存，用于組織學(xué)觀察;

4、無菌采集空白對(duì)照組、中藥處理組及陽性對(duì)照組仔豬回腸、盲腸、結(jié)腸內(nèi)容物，用于腸道菌群變化的分析。
　　結(jié)果顯示，中藥處理組在3個(gè)時(shí)間段十二指腸、空腸絨毛高度高于(P＜0.05)陽性對(duì)照組，第14d，十二指腸和空腸絨毛高度/隱窩深度比高于(P＜0.05)陽性對(duì)照組和空白對(duì)照組，第21d，回腸絨毛高度/隱窩深度比高于(P＜0.05)陽性對(duì)照組。在試驗(yàn)期內(nèi)，中藥處理組在3個(gè)時(shí)間段回腸、盲腸內(nèi)容物乳酸桿菌數(shù)(P＜0.05)均高于陽性對(duì)照組，

5、盲腸內(nèi)容物雙歧桿菌數(shù)高于(P＜0.05)陽性對(duì)照組;第7d，中藥處理組回腸、盲腸、結(jié)腸內(nèi)容物大腸桿菌數(shù)均低于（P＜0.05）空白對(duì)照組，添加第7d和第14d，結(jié)腸內(nèi)容物雙歧桿菌數(shù)高于(P＜0.05)陽性對(duì)照組。對(duì)腸道DGGE圖譜分析顯示，中藥處理組和陽性對(duì)照組腸道菌群的多樣性高于空白對(duì)照組;盲腸菌群多樣性高于回腸。中藥處理組和陽性對(duì)照組回腸微生物菌群相似性高，均達(dá)到82％以上;中藥處理組盲腸微生物菌群相似性高于空白對(duì)照組和陽性對(duì)照組。<