鏈脲佐菌素致原代培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元損傷作用以及吡格列酮和Humanin的保護作用觀察.pdf

1、山西醫(yī)科大學碩士學位論文鏈脲佐菌素致原代培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元損傷作用以及吡格列酮和Humanin的保護作用觀察姓名：馬國英申請學位級別：碩士專業(yè)：生理學指導教師：張策20100530山西醫(yī)科大學碩上學位論文在整體動物實驗條件下包括腹腔注射及腦室注射STZ可以干擾胰島素的信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)，引起糖代謝紊亂，同時引起神經(jīng)損傷及形成AD樣的退行性病變，那么在離體培養(yǎng)的神經(jīng)細胞STZ是否可引起同樣的神經(jīng)損傷吡格列酮(Pioglitazone)屬于噻唑烷

2、二酮(tIliazolid硫dio鵬，TZD)類胰島素增敏劑，主要通過結(jié)合和活化過氧化物酶體增殖物激活的受體丫(peroxisomeprolifbratorsactiVatedrec印tors，PP√佻)而增強細胞對胰島素作用的敏感性。毗格列酮對側(cè)腦室注射STZ的大鼠的空間記憶力和海馬的突觸結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元的受損有保護作用。而同樣屬于噻唑烷二酮類胰島素增敏劑的羅格列酮對散發(fā)性老年癡呆大鼠學習記憶功能有明顯的改善作用。DelaMonte等研究

3、發(fā)現(xiàn)噻唑烷二酮類胰島素增敏劑可能對AD有預防治療的作用。那么噻唑烷二酮類胰島素增敏劑吡格列酮是否對STZ誘導的皮層神經(jīng)細胞損傷也有保護作用刪是在AD患者大腦內(nèi)發(fā)現(xiàn)的由24個氨基酸組成的線性多肽，能夠有效抑制多種FAD(F鋤ilyAkmeimer’sdisease)基因突變和Ap衍生物誘發(fā)的神經(jīng)毒作用，初始被認為是AD特異性或AD相關毒性的神經(jīng)保護肽。HN可抑制APP，PSl，PS2突變誘發(fā)的神經(jīng)元死亡，拮抗Ap完整肽鏈以及AD片斷誘導的

4、神經(jīng)毒作用，但其作用機制還不清楚。隨著科學研究的逐步深入以及我們實驗室的研究發(fā)現(xiàn)，HN可以拮抗N加A所致的興奮毒，拮抗缺氧所致的皮層神經(jīng)元損傷，拮抗OA通過誘導tau蛋白過度磷酸化所致的神經(jīng)毒。提示烈具有廣泛的神經(jīng)保護作用，那么HN是否對STZ的神經(jīng)損傷有保護作用基于以上分析，本實驗分三部分，第一部分是觀察STZ對培養(yǎng)皮層神經(jīng)細胞的損傷作用(包括乳酸脫氫酶，CCK8和CalcenAM染色)；第二部分是觀察吡格列酮對STZ誘導的培養(yǎng)皮層神

5、經(jīng)細胞損傷的保護作用；第三部分是烈對STZ誘導的培養(yǎng)皮層神經(jīng)細胞損傷的保護作用。第一部分STZ對培養(yǎng)皮層神經(jīng)細胞的損傷作用本實驗應用離體原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)細胞的方法，培養(yǎng)到第8天時，加入不同濃度的STZ溶液(1“mo】／L，10“mo兒，100“mo】／L，1000肛Inol／L)和胰島素(15u／mL)。36小時后觀察細胞的活力以及活細胞數(shù)目(乳酸脫氫酶、CCK8和CalceillAM染色)。結(jié)果顯示：(1)細胞活力檢測(cck8)，加

6、入STZ36小時后，胰島素組與空白對照組相比細胞活力無統(tǒng)計學意義；與對照組相比，STZ(1肛m01／L)和STZ(10“mol／L)組細胞活力分別下降1888％和2774％(p／005，n=4)；STZ(100岫∞l／L)和STZ(1000“mol／L)細胞活力分別下降3709％和4088％(氏001，一)；(2)CalcenAM染色，胰島素組與空白對照組比較活細胞的數(shù)量沒有明顯變化，STZ(1“mol／L)和STZ(10“mol／L)