三株生防細菌對花生寄生曲霉的拮抗作用及促進花生萌發(fā)新菌株的篩選.pdf

1、花生是重要的油用、食用型經濟作物，含有豐富的脂肪、蛋白質和維生素，具有很高的食用價值。我國是最大的花生生產國，花生產量約占世界的五分之二?；ㄉN植、收獲及儲藏過程中易受真菌侵染產生黃曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)，特別是南方的溫暖潮濕氣候十分有利于黃曲霉毒素的產生，從而使花生品質受到嚴重影響。黃曲霉毒素具有極強的毒性，具有誘導突變、抑制免疫和致癌作用，是導致肝癌的主要因素之一，對人類健康和環(huán)境造成了極大的危害。自上世紀60年代發(fā)

2、現(xiàn)黃曲霉毒素危害以來，國內外學者對黃曲霉毒素相關領域做了大量的研究工作。近年來利用環(huán)境友好型生物防治技術已經受到各國政府和科學家的青睞，各國科學家紛紛采用生物學方法進行黃曲霉毒素防治策略的研究。研究主要包括培育黃曲霉毒素抗性作物品種，利用其它微生物的競爭、拮抗作用抑制產毒菌株的生長，從植物源或微生物發(fā)酵液中提取抗菌活性物質以抑制黃曲霉生長和產毒，已經取得了初步的成效。
　　本實驗室致力于用微生物方法防治黃曲霉毒素污染，已經分離出多

3、株對黃曲霉毒素產生菌有顯著抑制作用的生防細菌。本研究利用拮抗效果較好的三株細菌B5、LN和04接種花生，觀察其對花生寄生曲霉侵染的抑制作用及對花生萌發(fā)的影響，并從其它抗黃曲霉毒素生防細菌中篩選出對花生萌發(fā)有促進作用的新菌株。
　　首先將三株細菌發(fā)酵后制成菌懸液，用108，109，1010cfuml-1三種濃度菌懸液浸種處理，在0.8％的瓊脂平板上進行花生萌發(fā)實驗，發(fā)現(xiàn)三種濃度04浸種均能促進花生萌發(fā)，109cfuml-1處理促進效

4、果最明顯。1010cfuml-1B5和LN浸種顯著抑制了花生萌發(fā)，108cfuml-1和109cfuml-1濃度B5和LN浸種無抑制作用，于是采用109cfuml-1濃度的三株細菌進一步做瓊脂平板花生寄生曲霉拮抗實驗。拮抗實驗表明，04在0.8%的瓊脂平板條件下對寄生曲霉表現(xiàn)理想的拮抗效果，LN和B5對寄生曲霉沒有拮抗作用。
　　同時，采用1010cfuml-1三株細菌浸種后于土培實驗條件下進行花生萌發(fā)實驗與寄生曲霉拮抗實驗，結果

5、顯示，04一定程度上促進了根系發(fā)育，LN處理組幼苗生物質積累有所提高，B5顯著延遲花生萌發(fā)并抑制花生前期生長；三株細菌對花生果實及土壤中寄生曲霉均表現(xiàn)抑制作用，其中04對花生果實及果殼附近土壤中寄生曲霉抑制效果最好，LN對根系土壤中寄生曲霉拮抗作用明顯。
　　另外，從其它黃曲霉毒素生防細菌中篩選出三株顯著促進花生萌發(fā)的新菌株，分別為N1KM1、WPS2和WGB3，三株細菌均為革蘭氏陽性。其中N1KM1和WGB3為棒狀桿菌,WPS2