豬附紅細(xì)胞體部分生物學(xué)特性及診斷方法的研究.pdf

1、本研究工作分為三部分： 1.對確診為附紅細(xì)胞體感染的豬無菌采集抗凝血，純化附紅細(xì)胞體及其基因組DNA，根據(jù)已報(bào)道的豬附紅細(xì)胞體16S rRNA基因序列設(shè)計(jì)了一對特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果擴(kuò)增出了421bp的豬附紅細(xì)胞體片斷，然后對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行克隆和測序，所測序列已登錄GenBank(序列號為DQ223958)，并同已發(fā)表的進(jìn)行同源性分析，結(jié)果表明同源性為74.8％，進(jìn)一步的驗(yàn)證確認(rèn)該序列是豬附紅細(xì)胞體的16S rRNA基因

2、的部分序列。 2.采用抗豬附紅細(xì)胞體的單克隆抗體，通過IFA方法對48份疑似豬附紅細(xì)胞體感染的病豬血液進(jìn)行間接免疫熒光檢測，并與鏡檢及PCR檢測方法進(jìn)行比較，結(jié)果顯示IFA檢測的陽性率為62.5％，與PCR檢測陽性率為64.59％基本相符，比血涂片的瑞氏和姬姆薩染色鏡檢陽性率高出近30個百分點(diǎn)；而用豬肺炎支原體、豬鏈球菌和豬巴氏桿菌作的對照結(jié)果均陰性。 3.參照豬附紅細(xì)胞體16s rRNA的基因序列，設(shè)計(jì)引物，分別以標(biāo)準(zhǔn)