丹星通絡(luò)湯對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認為缺血再灌注損傷是大多數(shù)急性缺血性疾病的主要病理生理過程，而細胞凋亡則是器官、組織缺血再灌注損傷過程中細胞死亡的重要機制之一，因此干預(yù)細胞凋亡，從而防治缺血再灌注損傷已經(jīng)引起國內(nèi)外廣泛關(guān)注。在缺血后的不同時間，細胞內(nèi)有多種反應(yīng)性基因先后表達，其中P53基因作為轉(zhuǎn)錄因子，通過激活一系列下游基因發(fā)揮促凋亡作用。caspase-3的表達介導(dǎo)腦缺血后遲發(fā)性神經(jīng)細胞死亡及神經(jīng)細胞發(fā)生凋亡。丹星通絡(luò)湯由丹參、膽南星、三七等具有清

2、熱化痰、活血通絡(luò)作用的藥物組成，在臨床上對缺血性腦血管病的治療有很好的效果，前期實驗表明丹星通絡(luò)湯可以降低腦缺血再灌注大鼠的一氧化氮(NO)含量、增加超氧化物歧化酶(SOD)含量，通過上調(diào)反義核酸(Bcl-2)蛋白表達而減少大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞的凋亡。本實驗通過觀察丹星通絡(luò)湯對腦缺血再灌注大鼠腦組織中P53、caspase-3的表達及血清中LDH含量的影響，進一步探討星通絡(luò)湯對腦缺血再灌注損傷的保護作用機制。 方法：40只

3、健康雄性Wistar大鼠，采用大腦中動脈線栓法建立局灶腦缺血再灌注大鼠模型，并隨機將大鼠分為假手術(shù)組(Sham)、缺血再灌注組(I/R)、丹星通絡(luò)湯大，小劑量組和尼莫地平組，每組8只。丹星通絡(luò)湯組分別按15ml/kg(大劑量)， 7.5ml/kg(小劑量)，尼莫地平組10g/kg，術(shù)前連續(xù)灌胃給藥7d,每天一次。假手術(shù)組和缺血再灌組分別灌以7.5ml/kg的生理鹽水。大鼠局灶性腦缺血2 h，然后進行再灌注。在再灌注24 h斷頭取腦組織，

4、采用免疫組織化學(xué)法檢測腦組織中Caspase-3及P53的表達；HE染色觀察各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)變化；分光比色法測血清中乳酸脫氫酶(LDH)的含量。 結(jié)果： 1．組織形態(tài)學(xué)觀察假手術(shù)組細胞結(jié)構(gòu)正常；模型組腦組織中均見神經(jīng)細胞結(jié)構(gòu)模糊，胞體腫脹，尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解，核體不規(guī)則，有明顯軟化灶形成，周邊可見中性粒細胞浸潤；中藥組和尼莫地平組神經(jīng)細胞排列略紊亂，仍可見細胞皺縮和胞核固縮濃染現(xiàn)

5、象，但程度較模型明顯減輕；其中以中藥大劑量、尼莫地平組尤為顯著。 2．丹星通絡(luò)湯對腦缺血再灌注大鼠caspase-3、P53蛋白表達的影響假手術(shù)組偶見easpase-3陽性細胞，蛋白表達微弱；腦缺血2h再灌注24h后，easpase-3、P53陽性細胞假手術(shù)組明顯增強；與模型組相比，各治療組caspase-3、1353陽性細胞數(shù)均降低；與丹星通絡(luò)湯小劑量組相比，尼莫地平組、丹星通絡(luò)湯大劑量組caspase-3陽性細胞數(shù)明顯降低，但這兩組