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1、目的: 以經(jīng)誘導(dǎo)具有成骨細胞活性的骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)為種子細胞,同種異體生物衍生骨為載體,觀察細胞的體外培養(yǎng)特性和在生物衍生骨上的復(fù)合生長情況,為進一步研究此復(fù)合材料修復(fù)骨缺損提供實驗依據(jù)。 方法: 運用密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法,分離純化兔骨髓基質(zhì)細胞,并進行體外培養(yǎng)擴增;應(yīng)用成骨添加劑(地塞米松10<'-8> mol/L、β-甘油磷酸鈉10 mmol/L、L-抗壞血酸為50 μg/ml)定向誘導(dǎo)傳代骨髓基質(zhì)細胞為成
2、骨細胞:制作同種異體生物衍生骨,與誘導(dǎo)的成骨細胞進行體外復(fù)合培養(yǎng),并在相差顯微鏡和掃描電鏡下觀察細胞生長情況。 結(jié)果: 密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法分離純化的兔骨髓基質(zhì)細胞在體外生長良好,能連續(xù)傳代;傳代細胞經(jīng)成骨添加劑誘導(dǎo)后,具有較強的堿性磷酸酶活性,并能表達I型膠原蛋白,呈現(xiàn)成骨細胞活性;骨髓基質(zhì)細胞誘導(dǎo)的成骨細胞能在同種異體生物衍生骨上貼附生長、增殖。 結(jié)論: 骨髓基質(zhì)細胞可有效分離、純化,體外培養(yǎng)、擴增效果好,易
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