溶髓方對大鼠椎間盤退變中組織形態(tài)及軟骨終板IL-1β的影響.pdf

1、目的:椎間盤退變是危害人類健康的常見病和多發(fā)病,嚴重地影響著人們的生活質量。中醫(yī)學在治療椎間盤退行性病變方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗,在緩解和改善椎間盤退變方面顯示出獨特的療效?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)IL-1β在椎間盤退變過程中起到重要作用,但溶髓方對退變椎間盤內(nèi)炎癥因子的作用機制仍需進行深入研究。通過建立脊柱退變的動物模型,觀察在椎間盤退變中溶髓方對大鼠椎間盤組織形態(tài)和軟骨終板白介素-1β(IL-1β)的影響,明確溶髓方是否對軟骨終板中IL-1β含量

2、有調控作用,進一步探索溶髓方對退變椎間盤內(nèi)炎癥因子的作用機制,并為其臨床治療提供客觀評價指標,從而為治療椎間盤退變提供新的辦法和思路。通過探討其對椎間盤退行性變的影響,從而找到一個治療椎間盤退變較好的保守方法。
　　方法:選取36只 wistar大鼠,鼠齡6周,體重為(100±20)g,隨機分成假手術組、模型對照組、溶髓方實驗組,每組12只。實驗組沿頸1-7棘突做正中切口,剝離椎旁肌,切除頸3-7的棘上、棘間韌帶及兩側關節(jié)突關節(jié)后

3、外1/2,建立大鼠頸椎動力平衡失調模型,誘導脊柱及椎間盤加速退變(假手術組僅作頸背后正中皮切開縫合),造模2周后實驗組予以溶髓方中藥灌胃1月,假手術組和模型對照組喂等量生理鹽水。在術后9周、18周、36周處死每組四只動物,完整取下頸1-7節(jié)段包含上下椎體的椎間盤,分離頸3-7節(jié)段的軟骨終板和椎間盤,椎間盤退變分級評價按 Thompson椎間盤退變病理分級標準進行。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Elisa)檢測軟骨終板中白介素-1β(IL-1β)含

4、量,并在椎間盤組織中做 HE染色和在軟骨終板上做TUNEL染色,在形態(tài)學上評定椎間盤及軟骨終板退變程度。
　　結果:(1)椎間盤退變的組織形態(tài)學表現(xiàn)。溶髓方實驗組與模型對照組中均觀察到椎間盤明顯退變表現(xiàn),在實驗早期多表現(xiàn)為纖維環(huán)排列紊亂,并出現(xiàn)肉芽組織生長、血管充血、新生血管形成及大量炎性細胞浸潤,后期則出現(xiàn)與軟骨終板連接處完全斷裂,而髓核主要表現(xiàn)為脫水皺褶,體積縮小,最后纖維化。在模型對照組中,大鼠椎間盤退變程度隨時間的推移越來

5、越嚴重。(2)軟骨終板IL-1β的含量。隨著實驗的進行,模型對照組中椎間盤中 IL-1β含量明顯升高,第9周時模型對照組和溶髓方實驗組軟骨終板IL-1β含量之間統(tǒng)計學無顯著性差異(P>0.05),隨著培養(yǎng)時間的延長,大鼠椎間盤軟骨終板IL-1β含量增加(P<0.05),溶髓方實驗組較模型對照組軟骨終板IL-1β的含量明顯降低(P<0.05),提示溶髓方對軟骨終板IL-1β的增加有抑制作用。
　　結論:溶髓方可通過抑制椎間盤內(nèi)炎性因