抗HER-2工程抗體chA21對(duì)人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：觀(guān)察抗HER-2工程抗體chA21對(duì)高表達(dá)HER-2的人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用，并初步探討其可能的作用機(jī)制。 方法：成功建立人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型后，隨機(jī)將荷瘤裸鼠分為陰性對(duì)照NS組12只，chA21組6只和陽(yáng)性對(duì)照藥Hereeptin組6只共3組。chA21和Herceptin均按30mg·kg-1體重每周兩次靜脈注射，觀(guān)察腫瘤生長(zhǎng)變化，連續(xù)給藥6周后，處死全部荷瘤裸鼠，計(jì)算抑瘤率；觀(guān)察腫瘤組

2、織的病理變化，AB/PAS染色觀(guān)察腫瘤組織中黏液的分泌；應(yīng)用HE染色、透射電鏡和TUNEL等技術(shù)觀(guān)察chA21對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響；并利用組織芯片及免疫組化方法結(jié)合顯微圖像分析系統(tǒng)定量檢測(cè)腫瘤組織中：1)細(xì)胞增殖指標(biāo)Ki-67和NFκB的表達(dá)；2)凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2、caspase3及Fas蛋白的表達(dá)；3)與侵襲相關(guān)因子MMPs、TIMPs、VEGF及E-cad的表達(dá)。 結(jié)果：chA21以30mg·kg-1體重每周2

3、次尾靜脈注射給藥：1)能顯著抑制高表達(dá)HER-2的人卵巢癌SKOV3細(xì)胞裸小鼠移植瘤的生長(zhǎng)，其抑瘤率為30.53％。2)能下調(diào)移植瘤細(xì)胞Ki-67和NFκB的表達(dá)。3)HE染色光鏡觀(guān)察chA21組移植瘤細(xì)胞出現(xiàn)聚巢傾向，并有腺樣結(jié)構(gòu)形成趨勢(shì)，AB/PAS染色見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)AB陽(yáng)性物質(zhì)增多；細(xì)胞膜表面的E-cad表達(dá)增強(qiáng)。4)HE染色和透射電鏡均能觀(guān)察到chA21組移植瘤細(xì)胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象；且chA21組移植瘤細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于NS組。5)ch

4、A21組移植瘤細(xì)胞Bax、Fas和caspase3的表達(dá)增加，Bcl-2和NFκB的表達(dá)及Bcl-2/Bax比值下降。6)chA21組移植瘤細(xì)胞MMP-2、MMP-9和VEGF的表達(dá)下降，而TIMP-1、TIMP-2及E-cad的表達(dá)增加，MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1的比值下降。 結(jié)論：1)抗HER-2工程抗體chA21能夠抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生長(zhǎng)。其可能的機(jī)制是通過(guò)抑制NFκB的表達(dá)，下調(diào)

5、Ki-67的表達(dá)而抑制移植瘤增殖活性；2)抗HER-2工程抗體chA21能夠誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)Fas的表達(dá)，抑制Bcl-2，促進(jìn)Bax的表達(dá)，改善Bcl-2/Bax的平衡，激活caspase3的活性而完成的；3)抗HER-2工程抗體chA21能夠抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤MMP-2、MMP-9和VEGF的表達(dá)，促進(jìn)TIMP-1、TIMP-2及E-cad的表達(dá)，并糾正MMP-2/TI