家蠶核型多角體病毒Bmorf60基因的功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、桿狀病毒已經在世界上廣泛地應用于生物殺蟲劑,并且作為載體在昆蟲細胞以及蟲體上表達了許多外源基因。目前,家蠶核型多角體病毒Bombyx morinucleopolyherovirus(BmNPV)已經成功地在表面展示系統(tǒng)上得到了應用。此外,桿狀病毒在基因治療上具有很大的潛在應用價值。這些應用使得桿狀病毒感染的分子機理具有重大的研究意義。BmNPV的全基因組序列的測定,為單個基因功能研究的廣泛開展提供了基礎。Bmorf60是桿狀病毒特有的基

2、因,但其功能還不清楚。本文中對Bmorf6D基因的功能開展了初步研究。
　　 1.序列搜索分析發(fā)現(xiàn),Bmorf60的同源基因存在于所有的groupⅠ和部分groupⅡ核型多角體病毒基因組中,但在雙翅目、膜翅目核型多角體病毒和顆粒體病毒基因組中不存在。groupⅠ病毒Autographa californica multiplenucleopolyhedrovirus(AcMNPV)orf74是Bmorf60的同源基因。該基因表達

3、的產物是包涵體源病毒(occlusion-derived virus,ODV)粒子的一個結構蛋白。groupⅡ病毒Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus(HaNPV)ory68是Bmorf60的另一個同源基因。但是,orf68表達的產物卻不是HaNPV ODV粒子的結構蛋白。這些研究結果表明,Bmorf60在BmNPV生活周期中可能起著特殊的生物學功能。
　　 2.在含有BmNPV b

4、acmid的大腸桿菌E.coli中,得到了Bmorf60敲除的bacmid病毒。Bmorf60基因敲除的bacmid感染細胞后,與野生型bacmid相比,BV產量大幅下降,接著,將Bmorf60基因補回到相對應的區(qū)域得到拯救bacmid,BV產量得到恢復。用vBm60-null,vBm-wt和vBm60-repair轉染BmN細胞不同時間點的熒光顯微觀察,結果顯示vBm60-null比vBm-wt和vBm60-repair在BmN細胞中

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