豬源乳酸菌抗感染益生特性的研究.pdf

1、本試驗對來自呼和浩特市30日齡仔豬腸道中分離得到的32株乳酸菌中隨機(jī)選出兩株乳酸菌分別命名為LZ1、LZ2，并對其進(jìn)行細(xì)菌學(xué)、生化以及16S rRNA分子生物學(xué)鑒定。以及耐酸、耐膽鹽的試驗，并對其活菌體以及代謝物進(jìn)行體外抑菌試驗。以小白鼠為實驗?zāi)Ｐ?，以致病性大腸桿菌K88菌株作為指示菌，用ERIC-PCR方法檢測乳酸菌LZ1、LZ2體內(nèi)抗感染試驗，驗證LZ1、LZ2對指示菌的抑菌效果;用不同劑量的乳酸菌LZ1、LZ2灌服小鼠，在不同時間

2、分別用ELISA方法和流式細(xì)胞儀測定小白鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量變化以及外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD28+T細(xì)胞的生長規(guī)律。
　　研究結(jié)果表明，分離的乳酸菌LZ1、LZ2用傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)鑒定和分子生物學(xué)16SrRNA的鑒定相一致。乳酸菌活菌體沒有抑菌活性，而其代謝產(chǎn)物都有較強(qiáng)的抑菌特性，但pH值影響抑菌活性較大，隨著pH值的降低抑菌活性有升高的趨勢，在弱酸或者中性環(huán)境下失去抑菌活性，胃蛋白

3、酶和胰蛋白酶對代謝產(chǎn)物的影響不大。
　　在體內(nèi)抗感染的試驗中發(fā)現(xiàn)在停止灌服菌液的第5d，能在小鼠的腸道內(nèi)分離出所飼喂的乳酸菌并且不含有致病菌K88。
　　LZ1、LZ2低、中、高劑量組在第10，20，30天時血清中的IL-2含量極顯著高于對照組(p＜0.01)。LZ1、 LZ2低、中劑量組在第10，20，30天時血清中的IL-4含量高于對照組，但差異不顯著(P＞0.05)。LZ1低、中劑量組在第10，20，30天時血清中的I

4、FN-γ含量極顯著高于對照組(p＜0.01); LZ2低劑量組在10，20，30天時血清中的IFN-γ含量顯著高于對照組(p＜0.05）。LZ1低、高劑量組在第10，20，30天時血清中的TNF-旺含量極顯著低于對照組(p＜0.01）。LZ2低劑量組在第10，20天時血清中的TNF-α含量極顯著高于對照組(p＜0.01）。
　　LZ1低、中、高劑量組在第10時CD3+T細(xì)胞含量極顯著低于對照組（p＜0.01）;LZ2中、高劑量組在

5、第20，30天時CD3+T細(xì)胞含量極顯著低于對照組(p＜0.01）。LZ1中劑量組在第10，20，30天時CD4+T細(xì)胞含量顯著低于對照組(p＜0.05); LZ2中、高劑量組在第10，30天時CD4+T細(xì)胞含量顯著低于對照組(p＜0.05)。LZ1低、高劑量組在第10天時CD8+T細(xì)胞含量顯著低于對照組(p＜0.05); LZ2低、中、高劑量組在第10，20天時CD8+T細(xì)胞含量極顯著低于對照組(p＜0.01）。LZ1、LZ2低、中、