AFP啟動子慢病毒載體的構(gòu)建及人胎肝干細胞研究.pdf

1、世界上對干細胞的研究已有多年的歷史，它已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)研究的前沿之一。當(dāng)前，由于各種肝病患者不斷增長和肝臟捐獻器官來源的缺乏，對肝干細胞的研究已經(jīng)成為熱點，這將有助于更好的了解許多肝臟疾病的產(chǎn)生機理和可能的治療途徑，而胎肝是研究肝干細胞很好的實驗材料。本文通過以下三個方面對胎肝細胞的分離，培養(yǎng)，體外誘導(dǎo)分化及體內(nèi)移植進行了研究： 1將慢病毒載體plv的CMV啟動子替換為人基因組AFP啟動子，使該病毒感染胎肝細胞后，在AFP陽

2、性細胞中表達綠色熒光蛋白，從而可利用流式細胞儀分選出表達AFP即GFP陽性的胎肝細胞。該標(biāo)記篩選系統(tǒng)的建立為進一步研究胎肝細胞的生物學(xué)特性和肝干細胞的分離和應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。 2為了得到大量用于臨床治療和科學(xué)研究的細胞，僅靠分離原代細胞，不僅無法得到細胞量的保障，而且樣品不穩(wěn)定，費用昂貴。解決該問題最好的方法就是建立穩(wěn)定的原代細胞系，但通常原代分離胚胎來源的細胞在培養(yǎng)一段時間后會分化，增殖能力逐漸減弱直到停止分裂。通過兩種方