篩選靶向肝癌Bel-7402-ADM細胞MDR1基因的高效siRNA的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　篩選出靶向人肝癌多藥耐藥細胞亞系Bel-7402/ADM細胞MDR1基因的高效siRNA,為逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥提供新的分子靶點。
　　方法：
　　設計并化學合成4條靶向MDR1的siRNAs(mdr1si-1、mdr1si-2、mdrlsi-3和mdrlsi-4),通過Lipofectamine2000介導轉(zhuǎn)染Bel-7402/ADM細胞株,用RT-PCR檢測Bel-7402/ADM細胞MDR1 mRNA表達

2、、western blot檢測P-gp的表達和MTT檢測細胞對ADM的敏感性,綜合評價這4條siRNAs的沉默效果。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)siRNA干擾后,4條siRNAs均能不同程度逆轉(zhuǎn)Bel-7402/ADM細胞MDR1介導的多藥耐藥。4條siRNA轉(zhuǎn)染48小時后,mdrlsi-1組或mdrlsi-3組的mRNA的表達水平下降幅度較mdrlsi-4組或mdrlsi-2組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);轉(zhuǎn)染72h后P-gp

3、蛋白的表達量由低到高依次為mdrlsi-1組,mdrlsi-3和mdrlsi-4組, mdrlsi-2組(P<0.05);mdrlsi-1組對ADM耐藥的相對逆轉(zhuǎn)率最高,mdrlsi-3組次之(P<0.05),mdrlsi-4組和mdrlsi-2組的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　相比較其他3條siRNAs,mdr1si-1對人肝癌Bel-7402/ADM細胞MDR1介導的耐藥逆轉(zhuǎn)效果最好,其靶序列有望成

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