白屈菜紅堿對(duì)高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞形態(tài)和功能的影響.pdf

1、糖尿病心肌病是糖尿病最常見(jiàn)的慢性并發(fā)癥之一，其病理改變主要表現(xiàn)在心肌細(xì)胞的肥大、變性、灶性壞死，間質(zhì)有不溶性膠原蛋白積聚、纖維化，臨床表現(xiàn)早期以心臟舒張功能不全為主，晚期以收縮功能不全為主。關(guān)于糖尿病心肌發(fā)病機(jī)制的研究，主要集中于心肌細(xì)胞的代謝、鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)以及氧自由基異常等。有關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞功能調(diào)節(jié)在糖尿病的研究越來(lái)越受到重視，其發(fā)病的機(jī)制中，二脂酰甘油.蛋白激酶C(DAG-PKC)途徑過(guò)度激活起著樞紐作用。PKC作為第二信使的

2、靶蛋白，對(duì)心肌細(xì)胞的形態(tài)以及舒縮功能起著重要調(diào)節(jié)作用。高血糖可以通過(guò)DAG-PKC途徑引起細(xì)胞膜的損傷，抑制Na+-K+-ATP酶和鈣泵的活性，引起細(xì)胞內(nèi)鈣超載，從而導(dǎo)致從而導(dǎo)致心臟收縮以及舒張功能減退，最終導(dǎo)致心力衰竭。PKC的表達(dá)增加以及活性增強(qiáng)可以激活調(diào)節(jié)原癌基因c-fos. c-jun等的表達(dá)導(dǎo)致心室肌肥大，間質(zhì)纖維化及左心室功能減退。本實(shí)驗(yàn)以高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞為模型，通過(guò)測(cè)定心肌細(xì)胞直徑、搏動(dòng)頻率以及PKC-α、PKC-β

3、2、PKC-α的活性(P-PKC-α)、PKC-β2的活性(P-PKC-β2)、NF-kB和c-fos的表達(dá)水平，研究PKC抑制劑白屈菜紅堿(chelerythrine)在糖尿病心肌中的心肌保護(hù)作用，并探討PKC信號(hào)傳導(dǎo)通路在糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 目的：探討蛋白激酶C抑制劑白屈菜紅堿對(duì)高糖培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞形態(tài)和功能的影響，以及蛋白激酶C(Protein Kinase C，PKC)α、β2，核因子(Nuclear

4、 factor，NF)-kB，c-fos的表達(dá)水平及活性的變化。
　　 方法：建立乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)模型，隨機(jī)分成低糖(5mmol/L)、高糖(25.5mmol/L)和高糖(25.5mmol/L)+不同濃度白屈菜紅堿(1μmol/L，8μmol/L)組，分別觀察各組心肌細(xì)胞搏動(dòng)情況，測(cè)定心肌細(xì)胞直徑，并應(yīng)用Westem blot檢測(cè)心肌細(xì)胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-kB和c-fos的表達(dá)水平

5、。
　　 結(jié)果：高糖組心肌細(xì)胞搏動(dòng)頻率、細(xì)胞直徑以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-kB和c-fos的表達(dá)水平高于低糖培養(yǎng)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；加入不同濃度的PKC抑制劑白屈菜紅堿后能夠使高糖組心肌細(xì)胞搏動(dòng)頻率、細(xì)胞直徑以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF-KB和c-fos的表達(dá)水平均降低，并呈現(xiàn)濃度依賴性。
　　 結(jié)論：白屈菜紅堿能夠抑制高糖誘導(dǎo)的乳鼠心