pIERS-EGFP-VEGF質粒側腦室注射對大鼠腦缺血再灌注的保護作用的研究.pdf

1、目的：研究側腦室注射血管內皮生長因子(VEGF)蛋白表達質粒對缺血性神經(jīng)元損傷的影響及其可能的作用機制。 方法：對pIRES—EGFP/VEGF質粒進行鑒定，然后進行大量的擴增，提取，調整濃度，予側腦室注入質粒制備質粒組大鼠模型，用大腦中動脈(MCA)線栓法制備大鼠局灶性缺血/再灌注模型。缺血2小時，再灌注24小時后，處死大鼠，斷頭取腦，采用TTC染色和圖像分析處理系統(tǒng)測量梗塞灶大小，western—blot檢測鼠腦中p—AKT

2、蛋白的表達，并用電鏡觀察缺血大鼠的超微結構的變化。 結果：①MCAO2小時，再灌注24小時后，TTC顯色結果顯示，腦梗死體積在不同處理組有明顯差異。假手術組的腦梗死體積為0，而陽性實驗組，即VEGF質粒組右腦梗死體積較缺血組右腦梗死體積明顯減小(P<0.01)，證明表達大鼠血管內皮生長因子質粒pIERS—EGFP/VEGF具有一定的神經(jīng)損傷保護作用。②Western—blot檢測鼠腦中p—AKT蛋白的表達，結果顯示，與正常對照組

3、及假手術組比較，缺血組與質粒組的p—AKT表達均顯著增多(P<0.01)，質粒組與缺血組比較p—AKT的表達也顯著增多(P<0.01)。③電鏡觀察顯示：假手術組與正常組細胞結構正常，神經(jīng)元排列整齊，核膜光滑完整，核仁居中，邊界明顯；缺血組再灌注24h神經(jīng)元排列紊亂，核膜呈波浪狀，染色質濃縮成塊，線粒體水腫，膜雙層結構模糊不清，嵴斷裂甚至消失，粗面內質網(wǎng)明顯擴張；質粒組再灌注24h神經(jīng)元胞體和胞核腫脹，核膜清晰，染色質稍增多、邊聚。線粒體